استخلاص و تنقية البروتين المرتبط بالفايبرونكتين من بكتريا المكورات العنقودية الذهبية

الملخص AR

تم استخلاص و تنقية البروتين المرتبط بالفايبرونكتين من الجدار الخلوي لبكتريا المكورات العنقودية (Staphylococcus aureus).

إذ انتخبت 12 عزلة بكتيرية من مجموع (40) عزلة تم الحصول عليها من مختبرات مدينة الطب، و مختبر الصحة العامة و قسم التقنيات الإحيائية في كلية العلوم / جامعة بغداد، و أجريت على هذه العزلات كافة الاختبارات التشخيصية و التأكدية لغرض التأكد من نقاوتها و قدرتها على إنتاج البروتين المرتبط بالفايبرونكتين.

استخلص البروتين بنبذ العالق البكتيري في جهاز المنبذة المبردة (Cooling centrifuge) و تكسير الخلايا البكتيرية بالموجات فوق الصوتية بوساطة جهاز التكسير الكهربائي (Sonicator)، ركز المستخلص البروتيني بوساطة كبريتات الأمونيوم و من ثم بعملية الديلزة و الترشيح الفائق لغرض التخلص من أكبر نسبة ممكنة من الأملاح و الشوائب الموجودة في المحلول.

نقي المستخلص البروتيني بوساطة كروتوغرافيا الترشيح الهلامي على عمود هلام السيفاكريل S-200 إذ انفصلت قمتان بعد قراءة المستخلص الناتج عن طول موجي 280 نانوميتر، تم التأكد من نقاوة بروتين الالتصاق السطحي و ذلك بظهور حزمة واحدة عند إجراء الترحيل الكهربائي في هلام الاكريل امايد المتعدد بوجود المواد الماسخة SDS.

و بينت نتائج توصيف البروتين إن الوزن الجزيئي بطريقة الترشيح الهلامي و الترحيل الكهربائي على هلام الاكريل امايد المتعدد و بوجود المواد الماسخة للبروتين SDS و مركبتوايثانول فقد قدر الوزن الجزيئي في هذه الحالة بمقدار (591000) و (58000) دالتون و تبين من خلال مطابقة الوزن الجزيئي للبروتين مع الأوزان الجزيئية للبروتينات القياسية إن البروتين هو البروتين المرتبط بالفايبرونكتين.