التحري عن ذيفان ألفا المنتج من بكتيريا Clostridium perfringens المعزولة محليا

الملخص AR

اختبرت قابلیة بكتریا C.

perfringens المعزولة و المشخصة محلیا (26 عزلة) على إنتاج ذیفان الفا باستعمال وسطTrypticase Yeast extract Broth (TYB) ، قدر تركیز البروتین مبدئیا في راشح هذه العزلات، و أظهرت النتائج وجود تباین في تركیز البروتین الخام إذ تراوح بین 1.162 مایكروغرام / ملیلتر للعزلة رقم 3 ذات الإنتاجية العالیة للبروتین و 0.01 مایكروغرام / ملیلتر للعزلة رقم 23 ذات الإنتاجية الواطئة للبروتین.

اختبرت قابلیة العزلات على إنتاج ذیفان الفا بالطریقتین الأساسيتين الروتینیة متمثلة بالانتشار في وسط أكار مح البیض و قیاس العكورة في وسط مح البیض السائل، و أظهرت النتائج أعطاء 24عزلة النتیجة الموجبة للفحص بنسبة 92.31 %.

اتبعت طریقة هلاك الفئران لتحدید مدى سمیة عزلات بكتریا C.

perfringens، و ظهر أن 25 عزلة بنسبة 96.15 % كانت سامة بدلالة هلاك الفئران.

اعتمدت تقنیة الامتزاز المناعیة المرتبطة بالأنزیم ELISA كطریقة ثانیة للتحري عن قدرة العزلات على إنتاج ذیفان الفا، و أظهرت النتائج أن جمیع العزلات كانت موجبة مقارنة بالطرائق الروتینیة.

كما و اعتمد ناتج عملیة التضاعف لجین cpa المشفر لذیفان الفا كجینات في عملیة تشخیص بكتریا C.

perfringens و ذیفاناتها بتقنیة التفاعل التضاعفي لسلسلة الدنا PCR.

بینت النتائج أن جمیع العزلات أعطت نتیجة موجبة سواء عند التحري عن البكتریا أو ذیفان الفا سیما عند استعمال قالب الدنا المحضر بطریقة الغلیان بدلا من طرائق الاستخلاص المعتمدة.