استخلاص و تنقية إنزيم سايتوسين دي أمينيز المنتج من البكتيريا Esherichia coli

الملخص AR

تضمنت الدراسة عزل و توصيف يكتريا E.

coli من المرضى المصابين بالإسهال لغرض تحديد قابليتها على إنتاج أنزيم سايتوسين دي امينيز.

أستخلص الأنزيم بالتكسير باستعمال الأمواج فوق الصوتية إذ بلغت قيمة الفعالية التوعية للمستخلص الخام 5.3 وحدة / ملغرام بروتين و تقي الأنزيم بعدة خطوات تضمنت المعادة بالحرارة بدرجة 60 مدة ثلاثين دقيقة، إذ بلغت الفعالية التوعية 6.2 وحدة / ملغرام بروتين و عدد مرات التنقية2.1 مرة و الحصيلة الأنزيمية 53.8 %.

ثم نسب الأنزيم باستعمال كبريتات الأمونيوم بنسبة الإشباع 30م % 55 و قد أذيب الراسب بداريء فوسفات البوتاسيوم (0.5 مولار) و كانت قيمة الفعالية النوعية 0.81 وحدة / ملغرام بروتين و عدد مرات التنقية 2.1 مرة و حصيلة أنزيمية مقدارها 5.6، ثم مرر المحلول الانزيمي خلال عمود التبادل الأيوني باستعمال المبادل الأيوني DEAE-Ceuose إذ كانت الفعالية التوعية 189.9 وحدة/ ملغرام بروتين وعدد مرات التنقية 34.3 مرة و حصيلة أنزيمية 5.0 % و بعدها مرر المحلول الأنزيمي على عمود هلام Sepharose 6B إذ بلغت قيمة الفعالية التوعية 302.3 وحدة / ملغرام بروتين و بعدد مرات تنقية 57.2 مرة و حصيلة إنزيمية مقدارها 2.1 %.