Binding Stoichiometry of a Recombinant Selenophosphate Synthetase with One Synonymic Substitution E197D to a Fluorescent Nucleotide Analog of ATP, TNP-ATP
المؤلفون المشاركون
Preobrazhenskaya, Y. V.
Stenko, A. I.
Shvarts, M. V.
Lugovtsev, V. Y.
المصدر
العدد
المجلد 2013، العدد 2013 (31 ديسمبر/كانون الأول 2013)، ص ص. 1-8، 8ص.
الناشر
Hindawi Publishing Corporation
تاريخ النشر
2013-01-30
دولة النشر
مصر
عدد الصفحات
8
التخصصات الرئيسية
الملخص EN
The transformation of the strain DH5αTM-T1R with plasmid vector pET11a containing the cloned gene of bacterial selenophosphate synthetase (SPS), selD, from the E.
coli BL21-Gold (DE3) strain gives an overproducing strain of SPS with one synonymic substitution, E197D.
The transformation efficiency was estimated as 8 × 108 CFU/μg plasmid DNA.
28 mg of highly purified preparation of recombinant SPS capable of binding TNP-ATP was eluted from DEAE-Sephadex column in amount of 15 % from the total soluble protein in crude extract.
The fluorescent derivative of ATP, 2′(3′)-O-(2,4,6-trinitrophenyl)adenosine-5′-triphosphate (TNP-ATP), was used as a synthetic analog of the substrate for the monitoring and quantitative analysis of the functional activity of SPS.
The non-linear regression analysis of the saturation curve of TNP-ATP binding to D197 SPS with GraphPad Prism software fits to a model with 2 distinct binding sites with KDs different in order.
The SPS existence in a form of tetramer in given reaction conditions, in accordance with the concentration stoichiometry of 4 moles of TNP-ATP to 1 mole of recombinant protein, is being discussed.
The tetramer structure was predicted with molecular modelling software YASARA and modelled in vacuum using steepest descent minimization energy method.
We hypothesize here the recombinant SPS exists as a dimer in solution with two active sites capable of ATP binding in each subunit.
نمط استشهاد جمعية علماء النفس الأمريكية (APA)
Preobrazhenskaya, Y. V.& Stenko, A. I.& Shvarts, M. V.& Lugovtsev, V. Y.. 2013. Binding Stoichiometry of a Recombinant Selenophosphate Synthetase with One Synonymic Substitution E197D to a Fluorescent Nucleotide Analog of ATP, TNP-ATP. Journal of Amino Acids،Vol. 2013, no. 2013, pp.1-8.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-513500
نمط استشهاد الجمعية الأمريكية للغات الحديثة (MLA)
Preobrazhenskaya, Y. V.…[et al.]. Binding Stoichiometry of a Recombinant Selenophosphate Synthetase with One Synonymic Substitution E197D to a Fluorescent Nucleotide Analog of ATP, TNP-ATP. Journal of Amino Acids No. 2013 (2013), pp.1-8.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-513500
نمط استشهاد الجمعية الطبية الأمريكية (AMA)
Preobrazhenskaya, Y. V.& Stenko, A. I.& Shvarts, M. V.& Lugovtsev, V. Y.. Binding Stoichiometry of a Recombinant Selenophosphate Synthetase with One Synonymic Substitution E197D to a Fluorescent Nucleotide Analog of ATP, TNP-ATP. Journal of Amino Acids. 2013. Vol. 2013, no. 2013, pp.1-8.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-513500
نوع البيانات
مقالات
لغة النص
الإنجليزية
الملاحظات
Includes bibliographical references
رقم السجل
BIM-513500
قاعدة معامل التأثير والاستشهادات المرجعية العربي "ارسيف Arcif"
أضخم قاعدة بيانات عربية للاستشهادات المرجعية للمجلات العلمية المحكمة الصادرة في العالم العربي
تقوم هذه الخدمة بالتحقق من التشابه أو الانتحال في الأبحاث والمقالات العلمية والأطروحات الجامعية والكتب والأبحاث باللغة العربية، وتحديد درجة التشابه أو أصالة الأعمال البحثية وحماية ملكيتها الفكرية. تعرف اكثر