تقدير الكولسترول في الحليب بالطريقة الأنزيمية المستخدمة لتقدير كولسترول الدم

Abstract AR

حورت الطريقة الأنزيمية التي تستخدم في تقدير نسبة الكولسترول في الدم لتكون ملائمة لتقديره في الحليب.

اجريت الطريقة أولا بصوبنة دهن الحليب و هو موجود في عينة الحليب دون الحاجة إلى استخلاصه, حيث مزج 0.2 مل من الحليب الكامل الدسم أو نصف الدسم أو الحليب الفرز مع 5 مل من 0.5 مولاري هيدروكسيد البوتاسيوم الكحولي في أنبوبة اختبار، أغلقت جيدا و سخنت بحمام مائي على درجة حرارة 80 م لمدة 15 دقيقة مع محلول التحريك كل 5 دقائق.

و بعد تبريدها بالماء أضيف لها 1مل ماء مقطر و 5مل هكسان ومزجت لمدة 10 ثواني.

ثم جرى لها طرد مركزي على 5000 دورة في الدقيقة لمدة 5 دقائق، سحب من طبقة الهكسان 0.25 مل وجففت على درجة 37م و أضيف 1مل من المحلول الأنزيمي المكون من أنزيم ¬ البيروكسيديز و أوكسيديز الكولسترول و الاستريز الجهزة من شركة Spinreact الإسبانية.

و بعد الحضن على درجة حرارة 37 م / 10 دقائق قدرت التراكيز بجهاز المطياف على قدرها 550 نانوميتر والمقارنة مع قراءة محلول قياسي للكولسترول تركيزه 200 ملغم / 100 مل وقد كانت نتائج المتوسط الحسابي ± (الانحراف القياس) للحليب الفرز والنصف دسم والحليب كامل الدسم الدسم ( 1.29 ± 0.01 ؛ 5.30 ± 0.03 ؛12.19 ± 0.04 ملغم / 100 مل حليب) على الترتيب.

مما تجدر الإشارة إليه إلى انه كان من بين هذه النماذج نموذجا قياسيا معلوم التركيز لدراسة كفاءة و دقة الطريقة، و أشارت نتائج التحليل الإحصائي أن معامل التحديد باستخدام هذه الطريقة كان 99.89 % و التي تعكس كفاءة ودقة عاليتين مقارنة بمثيلاتها المعتمدة في تقدير الكولسترول.

تعتبر هذه الطريقة سهلة و سريعة وقليلة الكلفة و لها دقة عالية لذا ينصح باجرائها بشكل روتيني لتقدير نسب الكولسترول في الحليب و منتجاته.