دراسة كيموحياتية لإنزيم الكايتينيز و علاقته بالثلاسيميا

Other Title(s)

Biochemical study of chitinase and its relation with thalassemia

Joint Authors

علوش، ذكرى علي
براء رعد محمود

Source

مجلة علوم الرافدين

Issue

Vol. 23, Issue 2 (30 Jun. 2012), pp.111-127, 17 p.

Publisher

University of Mosul College of Science

Publication Date

2012-06-30

Country of Publication

Iraq

No. of Pages

17

Main Subjects

Medicine

Topics

Abstract AR

تضمن البحث دراسة سريرية لأنزيم الكايتينيز و علاقته بمرض الثلاسيميا إذ وجد أن المعدل الطبيعي لفعالية أنزيم الكايتينيز في مصل دم مجموعة السيطرة (1.79 ± 0.10 U / ml) و وجد انخفاض معنوي في فعالية الأنزيم لدى مجموعة المرضى عند مقارنته مع مجموعة السيطرة.

كما وجد أن فعالية الأنزيم لا تتأثر بالجنس في حين تزداد مع تقدم العمر لدى مجموعتي السيطرة و المرضى، و بينت النتائج عدم تأثر فعالية الأنزيم بنوع المرض (ألفا أو بيتا-ثلاسيميا) و شدة مرض البيتا-ثلاسيميا (الكبيرة و المتوسطة) و استئصال الطحال.

كما وجد ارتفاع معنوي في مستوى كل من أنزيمي الكلوتاميت بايروفيت ترانس أمينيز (GPT) و الكلوتاميت اوكزالواسيتيت ترانس أمينيز (GOT) و الحديد (Fe) و السعة الكلية لارتباط الحديد (TIBC) بينما وجد انخفاض معنوي في مستوى الهيموكلوبين لدى مرضى الثلاسيميا مقارنة بمجموعة السيطرة.

و من خلال ايجاد معامل الارتباط الخطي، تبين ارتباط أنزيم الكايتينيز بعلاقة عكسية معنوية مع الحديد و بعلاقة طردية معنوية مع أنزيم (GPT) لدى مجموعة السيطرة و بعلاقة طردية معنوية مع الهيموكلوبين لدى مجموعة المرضى.

أظهرت طريقة عزل أنزيم الكايتينيز من الجسيمات الحالة لبلازما الدم حزمتين بروتينيتين و وجد أعلى فعالية لدى (الحزمة B) مقارنة بطريقة عزل الأنزيم من محلول راسب كبريتات الأمونيوم بتشبع (75 %) لبلازما الدم إذا وجدت ثلاث حزم بروتينية و كانت أعلى فعالية لدى (الحزمة E) بتقنية الترشيح الهلامي باستخدام عمود الفصل الحاوي على (Sephadex G-75).

كما وجد ان الحزمتين البروتينيتين (B و E) لهما وزن جزيئي (1000 ± 39180 دالتون) و (1000 ± 36307 دالتون) على التوالي و وجد أن عدد مرات التنقية لأنزيم من الجسيمات الحالة لبلازما الدم أكبر من محلول راسب كبريتات الامونيوم.

و درست الظروف المثلى لعمل أنزيم الكايتينيز للحزمتين المعزولتين فوجد أن لهما زمن تفاعل أمثل عند الدقيقة (35) و (30) و الأس الهيدروجيني الأمثل عند (pH = 7) و درجة حرارة مثلى ( 60 C°) و (55 C°) و التركيز الأمثل لمادة الأساس الكايتين الغروي (12 mg / ml) و (10 mg / ml) و قيمة السرعة القصوى Vmax (2.08 U / ml) و (2.00 U / ml) و قيمة ثابت ميكيليس – منتن Km (2.12 mg / ml) و (2.00 mg / ml) على التوالي و تم تقدير الفعالية البيولوجية لأنزيم الكايتينيز المعزول من بلازما الدم (الحزمتين B و E) تجاه نمو بعض البكتيريا و الفطريات الممرضة و وجد أن للأنزيم القابلية على تثبيط نموها بنسبة (100 %) للحزمة (B) و (50 %) للحزمة (E).

Abstract EN

The present research is a clinical study of chitinase and its relation with thalassemia.

It had been found that the normal range of chitinase activity in serum of healthy control (1.79 ± 0.10 U / ml), and it had been found that significant decrease of chitinase activity for patients group when compared with controls group.

It was also found that the activity was not affected by sex whereas an increase was found with aging in both patients and control groups.

The result demonstrated that the chitinase activity was not affected by the type of thalassemia (α or β - thalassemia), distress of β- thalassemia (major and intermediate) and splenctomy.

The results show a significant increase in (GPT), (GOT), (Fe) and (TIBC) while also showed a significant decrease in hemoglobin level of thalassemia patients compared with control.

Correlation coefficient between chitinase activity and clinical variables of thalassemia patients studied showed a significal reversible relation between chitinase and (Fe) and irreversible relation between chitinase and (GPT) in control.

It also show a reversible relation between chitinase and hemoglobin in patients.

The isolation method of chitinase from lysosome of plasma (protein peak B) showed two protein peaks by gel filtration technique, using column containing sephadex G-75.

The activity of a chitinase showed in(protein peak B).while the isolation method of chitinase from ammonium sulphate solution (75 %) saturation of plasma showed three protein peaks by gel filtration technique, using same column.

The activity of a chitinase showed in (protein peak E), a high number of purification showed in (protein peak B) compared with (protein peak E), it was found that the two peaks (B and E) had apparent molecular weight (39180 ± 1000 dalton) and (36307 ± 1000 dalton) respectively.

The study of the optimum condition of chitinase activity in the two peaks show an optimum reaction time at (35), (30) minute, optimum pH at (7), optimum temperature at (60°C), (55°C), optimum concentration of substrate colloidal chitin (12 mg / ml), (10 mg / ml), Vmax (2.08 U / ml), (2.00 U / ml) and Km(2.12 mg / ml) and (2.00 mg / ml) respectively.

Finally the biological activity had been improved for the isolated chitinase from plasma (for B and E peak) upon the growths of some bacteria and fungi pathogen, it had been found that the enzyme had the ability to inhibit its growth at ratio (100 %) for peak (B) and (50 %) for peak (E).

American Psychological Association (APA)

براء رعد محمود وعلوش، ذكرى علي. 2012. دراسة كيموحياتية لإنزيم الكايتينيز و علاقته بالثلاسيميا. مجلة علوم الرافدين،مج. 23، ع. 2، ص ص. 111-127.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-306081

Modern Language Association (MLA)

براء رعد محمود وعلوش، ذكرى علي. دراسة كيموحياتية لإنزيم الكايتينيز و علاقته بالثلاسيميا. مجلة علوم الرافدين مج. 23، ع. 2 (حزيران 2012)، ص ص. 111-127.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-306081

American Medical Association (AMA)

براء رعد محمود وعلوش، ذكرى علي. دراسة كيموحياتية لإنزيم الكايتينيز و علاقته بالثلاسيميا. مجلة علوم الرافدين. 2012. مج. 23، ع. 2، ص ص. 111-127.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-306081

Data Type

Journal Articles

Language

Arabic

Notes

يتضمن مراجع ببليوجرافية : ص. 126-127

Record ID

BIM-306081