استخلاص و تنقية و توصيف الببسين المعزول من المعدة الرابعة للجمال Camelus dromedarius

Abstract AR

أظهرت نتائج هذه الدراسة احتواء مستخلص المعدة الرابعة للجمال على الكايموسين و الببسين، تم ترسيب الأنزيمات باستخدام كبريتات الأمونيوم بنسب إشباع تراوحت بين 80-35 %تشبع، ثم أجريت خطوة التنقية اللاحقة باستخدام عمود من المبادل الأيوني Cellulose32-DEAE و الترشيح الهلامي على عمود من ال Sephadex G-100 أوضحت نتائج كروماتوغرافيا التبادل الأيوني بأسلوب التدرج الملحي الخطي وجود ثلاث قمم في التراكيز 0.24 و 0.43 و 0.54 مولار كلوريد الصوديوم و تبين من خلال دراسة قدرة هذه القمم على تثبيط نشاط ال Ribonuclease أن القيمة الأولى (P1) تمثل الكايموسين في حين تمثل القمتين P2 و P3 ببسين B و A على التوالي، و توزعت الفعالية التخثرية بين هذه الأنزيمات على النحو الآتي 11.62 و 25.98 و 35.40 % للكايموسين و الببسين B و A على التوالي .

تبين من خلال هذه الدراسة أيض اً أن الوزن الجزيئي للببسين المنقى و المقدر بطريقة الترشيح الهلامي كان بحدود 35000 و 36500 دالتون للببسين B و A على التوالي .

و وجد أن هذه الأنزيمات هي ليست من البروتينات السكرية glycoproteins وتحتوي على 0.7 و 1.1 مول من الفوسفات العضوي للمول الواحد من البروتين لكل من ببسين B و A على التوالي.

و أوضحت النتائج استجابة كل من ببسين B و A لبعض الكواشف و أن كلا المتناظرين (Isoenzymes) ليس من البروتينات السيرنية Serine proteases و الثايولية Thiol proteases أو المعدنية Metallo proteases و لوحظ أن التايروسين لا يشكل جزءاً مهما من الموقع الفعال Active site من الأنزيم.