استخلاص و تنقية أنزيم Staphylolysin المنتج من بكتيريا Pseudomonas aeruginosa

Abstract AR

عزلت بكتريا Pseudomonas aeruginosa من عينات سريرية مختلفة تضمنت الإدرار، و القشع ، و البراز، و مسحات الأذن، و الجروح، و الحروق.

و اختبرت قابليتها على إنتاج إنزيم الستافيلولايسين على وسط ترتبك صويا الصلب + 0.2 % (وزن / حجم) من بكتريا Staphylococcus aureus المعزولة المقتولة بالحرارة عند درجة 100م.

إذ تراوحت أقطار الهالة الشفافة 5-22ملم حيث انتخبت العزلة P16 لاستخلاص الستافيلولايسين LasA) A)، إذ بلغت الفعالية النوعية لها (8.59) وحدة / ملغم بروتين ، و العزلة P5 لاستخلاص الستافيلولايسينLasD) D )، إذ بلغت الفعالية النوعية لها (66-0) وحدة / ملغم بروتين، لكونهما الأغزر إنتاجا للإنزيم.

استخلص إنزيم الستافيلولايسين بالنبذ المركزي المبرد و تمت تنقيته جزئيا بترسيبه بكبريتات الامونيوم بنسبة إشباع 80 % ثم بكروموتوغرفيا التبادل ألايوني باستخدام المبادل DEAE-Cellulose، بينت النتائج إن الفعالية الأنزيمية الحالة للعنقوديات Staphylolytic activity لأنزيم الستافيلولايسين A ظهرت في القمة الأولى، و بلغت عدد مرات التنقية 74.10 مرة و بحصيلة أنزيمية 2.14 %، فيما أظهرت القمة الثانية الفعالية الأنزيمية الحالة للعنقوديات لأنزيم الستافيلولايسين Dبعدد مرات تنقية 9.1 مرة و بحصيلة أنزيمية 18.14 %.