استخلاص و تنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية
Other Title(s)
Extraction and purification of protease from locally okra pods (abelmoschus esculentus)
Joint Authors
علي والي موحي
شاكر، خالدة عبد الرحمن
Source
Issue
Vol. 46, Issue 3 (30 Jun. 2015), pp.426-432, 7 p.
Publisher
University of Baghdad College of Agriculture
Publication Date
2015-06-30
Country of Publication
Iraq
No. of Pages
7
Main Subjects
Topics
Abstract AR
هدفت هذه الدراسة إلى استخلاص و تنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية إذ أجريت عملية الاستخلاص باستخدام عشرة محاليل مختلفة في الرقم الهيدروجيني و القوة الأيونية، إذ أعطى محلول دارئ الفوسفات برقم هيدروجيني 7 و تركيز 0.05 مولار بوجود 2% كلوريد الصوديوم أعلى فعالية بالمقارنة بالمحاليل الأخرى بلغت الفعالية 7.2 وحدة / مل في حين تراوحت الأخريات بين 5.9 – 0.8 وحدة / مل.
تلى ذلك عملية تنقية الإنزيم على عدة مراحل شملت الترسيب بكبريتات الأمونيوم بنسبة تشبع بين 85 – 20% إذ أعطت فعالية نوعية و عدد مرات تنقية و حصيلة أنزيمية (21.52 وحدة / ملغم و 1.24 مرة و 82.83%) بالتتابع، ثم مرر الإنزيم على عمود DEAE-cellulose بأبعاد 22 x 1.1 سم و الذي نتج عنها فعالية نوعية بلغت 88.50 وحدة / ملغم، فعالية كلية 566.40، في حين كانت عدد مرات التنقية و الحصيلة الإنزيمية لها 46.67% بالتتابع، و استكملت عملية التنقية باستخدام الترشيح الهلامي باستخدام هلام السيفادكس G-75 بأبعاد 65 x 1.5 سم إذ أعطت فعالية نوعية و عدد مرات تنقية و حصيلة إنزيمية (98.82 وحدة / ملغم و 5.7 مرة و 40.17%) بالتتابع، في حين أجريت عملية التأكد من نقاوة الإنزيم باستخدام الترحيل الكهربائي لهلام الاكريل امايد NATIVE – PAGE %10 بغياب المواد الماسخة و التي أظهرت وجود حزمة بروتينية واحدة تابعة لبروتييز قرنات الباميا، و بالنتيجة، يمكن لقرون الباميا أن تكون أحد المصادر الطبيعية للبروتييزات، و توصي الدراسة الحالية بمزيد من البحوث بشأن الوسائل الملائمة لإزالة المادة الصمغية و من ثم زيادة كفاءة الاستخلاص الإنزيمي.
Abstract EN
This study aimed to extract, purify, and characterize the protease of local Okra Abelmoschus esculentus pods.
The extraction process was conducted using ten extraction solutions with different pH and ionic strength values.
Phosphate buffer solution with (pH 7, 0.05M, containing 2% sodium chloride) gave the highest activity which was (7.2 Unit/ml) as compared to other solutions, which ranged from 0.8-5.9 Unit/ml.
The extracted enzyme purified by several stages.
Being, precipitation by gradual addition of Ammonium sulphate from 20 to 85% saturation, then the precipitated enzyme was dialyzed and fractionated through DEAE-Cellulose (22X1.1cm), the enzymic fractions were pooled.
The specific activity, purification fold and the enzyme yield values were 21.52 units/mg, 1.24 and 82.83% respectively.
For further purification the enzyme fractions applied to G-75 Sephadex column (65x 1.5cm), the specific activity, enzyme yield and purification fold value were 98.82Unit/mg, 46.70%, 5.1, respectively .Electrophoresis analysis in the absence of SDS showed single band as indicator for enzyme purity.
In conclusion, Okra pods could be one of natural source for proteases and this study recommended further studies regarding the adequate means for removal of the mucilage in order to increase the extraction efficiency.
American Psychological Association (APA)
علي والي موحي وشاكر، خالدة عبد الرحمن. 2015. استخلاص و تنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية. مجلة العلوم الزراعية العراقية،مج. 46، ع. 3، ص ص. 426-432.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-573081
Modern Language Association (MLA)
علي والي موحي وشاكر، خالدة عبد الرحمن. استخلاص و تنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية. مجلة العلوم الزراعية العراقية مج. 46، ع. 3 (حزيران 2015)، ص ص. 426-432.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-573081
American Medical Association (AMA)
علي والي موحي وشاكر، خالدة عبد الرحمن. استخلاص و تنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية. مجلة العلوم الزراعية العراقية. 2015. مج. 46، ع. 3، ص ص. 426-432.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-573081
Data Type
Journal Articles
Language
Arabic
Notes
يتضمن مراجع ببليوجرافية : ص. 431-432
Record ID
BIM-573081