استخلاص و تنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية

Abstract AR

هدفت هذه الدراسة إلى استخلاص و تنقية بروتييز قرنات الباميا Abelmoschus esculentus المحلية إذ أجريت عملية الاستخلاص باستخدام عشرة محاليل مختلفة في الرقم الهيدروجيني و القوة الأيونية، إذ أعطى محلول دارئ الفوسفات برقم هيدروجيني 7 و تركيز 0.05 مولار بوجود 2% كلوريد الصوديوم أعلى فعالية بالمقارنة بالمحاليل الأخرى بلغت الفعالية 7.2 وحدة / مل في حين تراوحت الأخريات بين 5.9 – 0.8 وحدة / مل.

تلى ذلك عملية تنقية الإنزيم على عدة مراحل شملت الترسيب بكبريتات الأمونيوم بنسبة تشبع بين 85 – 20% إذ أعطت فعالية نوعية و عدد مرات تنقية و حصيلة أنزيمية (21.52 وحدة / ملغم و 1.24 مرة و 82.83%) بالتتابع، ثم مرر الإنزيم على عمود DEAE-cellulose بأبعاد 22 x 1.1 سم و الذي نتج عنها فعالية نوعية بلغت 88.50 وحدة / ملغم، فعالية كلية 566.40، في حين كانت عدد مرات التنقية و الحصيلة الإنزيمية لها 46.67% بالتتابع، و استكملت عملية التنقية باستخدام الترشيح الهلامي باستخدام هلام السيفادكس G-75 بأبعاد 65 x 1.5 سم إذ أعطت فعالية نوعية و عدد مرات تنقية و حصيلة إنزيمية (98.82 وحدة / ملغم و 5.7 مرة و 40.17%) بالتتابع، في حين أجريت عملية التأكد من نقاوة الإنزيم باستخدام الترحيل الكهربائي لهلام الاكريل امايد NATIVE – PAGE %10 بغياب المواد الماسخة و التي أظهرت وجود حزمة بروتينية واحدة تابعة لبروتييز قرنات الباميا، و بالنتيجة، يمكن لقرون الباميا أن تكون أحد المصادر الطبيعية للبروتييزات، و توصي الدراسة الحالية بمزيد من البحوث بشأن الوسائل الملائمة لإزالة المادة الصمغية و من ثم زيادة كفاءة الاستخلاص الإنزيمي.