توصيف إنزيم البولي كالاكتيورونيز Polygalacturonase المنتج من العزلة المحلية B36 لبكترياBacillus megaterium

Other Title(s)

Characterization of purified polygalacturonase produced by the local Isolate (B36)‎ of Bacillus megaterium

Joint Authors

الخيون، صلاح ناجي عزيز
الأسدي، آمال كاظم غضبان
قيثار رشيد مجيد

Source

مجلة الكوفة للعلوم الزراعية

Issue

Vol. 8, Issue 2 (30 Jun. 2016), pp.238-256, 19 p.

Publisher

University of Kufa Faculty of Agriculture

Publication Date

2016-06-30

Country of Publication

Iraq

No. of Pages

19

Main Subjects

Biology

Topics

Abstract AR

تمت دراسة صفات أنزيم البولي كالاكتيورونيز المنقى و المنتج من العزلة المحلية (B36) لبكتريا Bacillusmegaterium و التي انتخبت كأفضل عزلة محلية لبكتريا Bacillusssp.

لإنتاج الأنزيم إذ أعطت أعلى فعالية أنزيمية باستعمال المزارع المغمورة.

كان الوزن الجزيئي للإنزيم 65 كيلو دالتون باستعمال تقنية الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الأكريلامايد بوجود SDS، أما الدالة الحامضية المثلى لفعالية أنزيم البولي كالاكتيرونيز فكانت 7.0 إذ بلغت الفعالية الأنزيمية 1639.256 وحدة / مل، و الدرجة الحرارية المثلى للفعالية كانت 50م و قد أعطت فعالية مقدارها 1619.673 وحدة / مل.

أما ثباتية إنزيم البولي كالاكتيورونيز فكانت الدالة الحامضية المثلى لها (6.5-7.5) في حين الدرجة الحرارية المثلى لها تراوحت بين (0-50) م لمدة 30 دقيقة.

كما درس تأثير بعض الأيونات و المركبات الكلابية و المختزلة في ثباتية الأنزيم و التي شملت Mn2+ و Fe3+ و Ca2+ التي زادت من فعالية الأنزيم عند تركيز 5 ملي مولاري فبلغت 115% و 105% و 110% على التوالي، بينما عملت أيونات Cu2 على تثبيط فعالية الإنزيم بنسبة 10% عند تركيز 1 ملي مولاري و ازداد التثبيط للإنزيم عند تركيز 5 ملي مولاري و بنسبة 50% إما Mg2+ فقد زادت من الفعالية بنسبة 110% عند تركيز 1 ملي مولاري و ازدادت الفعالية لتصل إلى 130% عند تركيز 5 ملي مولاري و ازداد التثبيط للإنزيم عند تركيز 5 ملي مولاري و ازدادت الفعالية لتصل إلى 130 % عند تركيز 5 ملي مولاري، و لم تظهر كل من اليوريا و EDTA تأثيرا في الفعالية الأنزيمية عند تركيز 1 ملي مولاري و لكنهما ثبطا الفعالية بنسبة 30 % و 60 % على التوالي عند تركيز 5 ملي مولاري.

و التركيز 0.1 % (وزن / حجم) من مادة SDS فقد ثبط 10% من الفعالية الأنزيمية.

بلغت الثوابت الحركية للأنزيم 3.125 % لقيمة Km في حين بلغت السرعة القصوى Vmax0.043 وحدة / ملي مولاري، و كانت قيمة طاقة التنشيط للتفاعل الأنزيمي هي 38.613 كيلو سعره / مول.

Abstract EN

Characterization of the purified polygalacturonase which was produced by the local isolate (B36) of Bacillus megaterium was studied.

The isolate was gave maximum enzymatic activity by using submerged cultures.

The molecular weight of the enzyme was 65kdalton by using SDS-PAGE, the optimal pH of the enzyme activity was 7.0, and the enzyme activity was 1639.256 unit/ml, the optimal temperature of the enzyme activity was 50C, and the activity was 1619.673 unit/ml.

The pH of polygalacturonase stability was between (6.5-7.5) but the thermo stability of the enzyme was between (0-50)ºC.

The effect of some ions, chelating compounds and reducing agents onenzyme stability was also studied, Mn+2, Fe+3 and Ca+2 were increased the enzymatic activity to 115%, 105% and 110% respectively at the concentration 5mM, but Cu+2 inhibited the enzymatic activity to 10% at 1mM and the inhibition was increased to 50% at 5mM, while Mg+2 increased the enzymatic activity to 110% at 1mM, and 130% at 5mM.

The urea and EDTA did not effect on activity at 1mM but inhibited the activity to 30% and 60% respectively at 5mM, also SDS inhibited the activity at 0.1%(wt/v).

The kinetics constants of the enzyme were 3.125%for Km and 0.043 unit/ml for Vmax.The activation energy for the enzymatic reaction was 38.613 kcal/mole.

American Psychological Association (APA)

الأسدي، آمال كاظم غضبان وقيثار رشيد مجيد والخيون، صلاح ناجي عزيز. 2016. توصيف إنزيم البولي كالاكتيورونيز Polygalacturonase المنتج من العزلة المحلية B36 لبكترياBacillus megaterium. مجلة الكوفة للعلوم الزراعية،مج. 8، ع. 2، ص ص. 238-256.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-687796

Modern Language Association (MLA)

الأسدي، آمال كاظم غضبان....[و آخرون]. توصيف إنزيم البولي كالاكتيورونيز Polygalacturonase المنتج من العزلة المحلية B36 لبكترياBacillus megaterium. مجلة الكوفة للعلوم الزراعية مج. 8، ع. 2 (2016)، ص ص. 238-256.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-687796

American Medical Association (AMA)

الأسدي، آمال كاظم غضبان وقيثار رشيد مجيد والخيون، صلاح ناجي عزيز. توصيف إنزيم البولي كالاكتيورونيز Polygalacturonase المنتج من العزلة المحلية B36 لبكترياBacillus megaterium. مجلة الكوفة للعلوم الزراعية. 2016. مج. 8، ع. 2، ص ص. 238-256.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-687796

Data Type

Journal Articles

Language

Arabic

Notes

يتضمن مراجع ببليوجرافية : ص. 251-255

Record ID

BIM-687796