تنسيل مورثة الصدمة الحرارية GroEL لدى اليرسينيا و التعبير البروتيني لها باستخدام بلاسميد التعبير البروتيني pHEN6
Other Title(s)
Cloning and protein expression of Yersinia GroEL using pHEN6 plasmid
Joint Authors
حمد، إبتسام
عبادي، عبد القادر
أبو عسلي، لبنى
Source
مجلة جامعة دمشق للعلوم الأساسية
Issue
Vol. 28, Issue 2 (31 Dec. 2012), pp.443-459, 17 p.
Publisher
Publication Date
2012-12-31
Country of Publication
Syria
No. of Pages
17
Main Subjects
Abstract EN
Yersinia enterocolitica is a gram negative, pathogenic, facultative intracellular bacterium.
It parasites on macrophages and grows in phagosomes, in which a group of proteins plays critical roles in tolerating stressful conditions within the cell.
One of these important proteins is the heat shock protein (HSP) GroEL.
In this work, we aimed to produce a recombinant GroEL protein by gene cloning and protein expression and purification, in order to use the recombinant protein in the future to study its function in the microbe life cycle and the possibility to use it against the yersinosis.
Furthermore, beside being vital for macrophage penetration during infection, GroEL is one of the most immunodominant proteins of Yersinia.
Genomic DNA from Y.
enterocolitica was extracted from a PCR-confirmed strain using Yersinia Multiplex PCR.
From this genomic DNA, the GroEL gene was amplified by PCR using specific primers that contain the restriction sites XbaI and BstEII at 3’ and 5’ ends, respectively.
The amplified and digested GroEL DNA fragment, as well as the digested pHEN6 plasmid, were ligated and then used to transform E.
coli competent cells.
The positive colonies expressed a soluble rGroEL protein (60 kDa) in the periplasmic space and this recombinant protein could be purified by metal affinity chromatography, as demonotrated by electrophoresis (SDS-PAGE 10%) and gel staining or immunoblotting using 6x-His specific antibody.
American Psychological Association (APA)
أبو عسلي، لبنى وحمد، إبتسام وعبادي، عبد القادر. 2012. تنسيل مورثة الصدمة الحرارية GroEL لدى اليرسينيا و التعبير البروتيني لها باستخدام بلاسميد التعبير البروتيني pHEN6. مجلة جامعة دمشق للعلوم الأساسية،مج. 28، ع. 2، ص ص. 443-459.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-749985
Modern Language Association (MLA)
حمد، إبتسام....[و آخرون]. تنسيل مورثة الصدمة الحرارية GroEL لدى اليرسينيا و التعبير البروتيني لها باستخدام بلاسميد التعبير البروتيني pHEN6. مجلة جامعة دمشق للعلوم الأساسية مج. 28، ع. 2 (2012)، ص ص. 443-459.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-749985
American Medical Association (AMA)
أبو عسلي، لبنى وحمد، إبتسام وعبادي، عبد القادر. تنسيل مورثة الصدمة الحرارية GroEL لدى اليرسينيا و التعبير البروتيني لها باستخدام بلاسميد التعبير البروتيني pHEN6. مجلة جامعة دمشق للعلوم الأساسية. 2012. مج. 28، ع. 2، ص ص. 443-459.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-749985
Data Type
Journal Articles
Language
Arabic
Notes
يتضمن مراجع ببليوجرافية : ص. 457-459
Record ID
BIM-749985