Development of the Multiple Gene Knockout System with One-Step PCR in Thermoacidophilic Crenarchaeon Sulfolobus acidocaldarius
المؤلفون المشاركون
المصدر
العدد
المجلد 2017، العدد 2017 (31 ديسمبر/كانون الأول 2017)، ص ص. 1-12، 12ص.
الناشر
Hindawi Publishing Corporation
تاريخ النشر
2017-10-31
دولة النشر
مصر
عدد الصفحات
12
التخصصات الرئيسية
الملخص EN
Multiple gene knockout systems developed in the thermoacidophilic crenarchaeon Sulfolobus acidocaldarius are powerful genetic tools.
However, plasmid construction typically requires several steps.
Alternatively, PCR tailing for high-throughput gene disruption was also developed in S.
acidocaldarius, but repeated gene knockout based on PCR tailing has been limited due to lack of a genetic marker system.
In this study, we demonstrated efficient homologous recombination frequency (2.8 × 104 ± 6.9 × 103 colonies/μg DNA) by optimizing the transformation conditions.
This optimized protocol allowed to develop reliable gene knockout via double crossover using short homologous arms and to establish the multiple gene knockout system with one-step PCR (MONSTER).
In the MONSTER, a multiple gene knockout cassette was simply and rapidly constructed by one-step PCR without plasmid construction, and the PCR product can be immediately used for target gene deletion.
As an example of the applications of this strategy, we successfully made a DNA photolyase- (phr-) and arginine decarboxylase- (argD-) deficient strain of S.
acidocaldarius.
In addition, an agmatine selection system consisting of an agmatine-auxotrophic strain and argD marker was also established.
The MONSTER provides an alternative strategy that enables the very simple construction of multiple gene knockout cassettes for genetic studies in S.
acidocaldarius.
نمط استشهاد جمعية علماء النفس الأمريكية (APA)
Suzuki, Shoji& Kurosawa, Norio. 2017. Development of the Multiple Gene Knockout System with One-Step PCR in Thermoacidophilic Crenarchaeon Sulfolobus acidocaldarius. Archaea،Vol. 2017, no. 2017, pp.1-12.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-1125470
نمط استشهاد الجمعية الأمريكية للغات الحديثة (MLA)
Suzuki, Shoji& Kurosawa, Norio. Development of the Multiple Gene Knockout System with One-Step PCR in Thermoacidophilic Crenarchaeon Sulfolobus acidocaldarius. Archaea No. 2017 (2017), pp.1-12.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-1125470
نمط استشهاد الجمعية الطبية الأمريكية (AMA)
Suzuki, Shoji& Kurosawa, Norio. Development of the Multiple Gene Knockout System with One-Step PCR in Thermoacidophilic Crenarchaeon Sulfolobus acidocaldarius. Archaea. 2017. Vol. 2017, no. 2017, pp.1-12.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-1125470
نوع البيانات
مقالات
لغة النص
الإنجليزية
الملاحظات
Includes bibliographical references
رقم السجل
BIM-1125470
قاعدة معامل التأثير والاستشهادات المرجعية العربي "ارسيف Arcif"
أضخم قاعدة بيانات عربية للاستشهادات المرجعية للمجلات العلمية المحكمة الصادرة في العالم العربي
تقوم هذه الخدمة بالتحقق من التشابه أو الانتحال في الأبحاث والمقالات العلمية والأطروحات الجامعية والكتب والأبحاث باللغة العربية، وتحديد درجة التشابه أو أصالة الأعمال البحثية وحماية ملكيتها الفكرية. تعرف اكثر