Purification and characterizatiou'ofnadp-malic enzyme from pearl millet leaves

العناوين الأخرى

تنقية و خواص إنزيم الماليك (NADP-Malic Enzyme)‎ المستخلص من نبات الدخان

المؤلف

al-Bassam, Badr Abd al-Rahman

المصدر

Saudi Journal of Biological Sciences

العدد

المجلد 7، العدد 1 (30 يونيو/حزيران 2000)، ص ص. 30-38، 9ص.

الناشر

الجمعية السعودية لعلوم الحياة

تاريخ النشر

2000-06-30

دولة النشر

السعودية

عدد الصفحات

9

التخصصات الرئيسية

الأحياء

الموضوعات

الملخص AR

تمت تنقية إنزيم الماليك (NADP–malic enzyme, E C 1, 1, 1, 40) المستخلص من أوراق نبات الدخن (Pemesitum typhoids L) باستخدام طرق الفصل الهلامي (Gel filtration) و كروماتوجرافيا التبادل الأيوني (Ion exchange) و كروماتوجرافيا الارتباط (Affinity chromatography).

و قد تمت تنقية الأنزيم لمائتي ضعف من المستخلص بنشاط نوعي مقداره 82 وحدة لكل مليجرام من البروتين.

و أظهرت نتائج الفصل الهلامي و التفريد الكهربي أن الإنزيم رباعي التركيب و وزنه الجزئي حوالي 270 كيلو دالتون (kDa), و تبلغ عدد الوحدات المكون للإنزيم أربعة وحدات, وزن كل واحدة منها 68 كيلو دالتون (kDa) تقريبا.

و أوضحت الدراسة أن للإنزيم احتياجا مطلقا لبعض الأيونات الثنائية التكافؤ خاصة المغنيسيوم أو المنجنيز حيث لا يعمل الإنزيم إلا في وجود أحدهما إذ بلغت قيمة ثابت ميكاليس (Km) 66.6 و 133 ميكرومولر لكل منهما على التوالي.

و أشارت دراسة حركية تفاعلات الإنزيم إلى شدة ارتباطه بمادتي التفاعل, فقد تم الحصول على ثابت ميكاليس لكل من حامض الملليك (L-malate) و المرفق الإنزيمي (NADP+) بمقدار 91 و 28 ميكرومولر على التوالي.

الملخص EN

NADP-malic enzyme (EC 1.1.1.40) has been purified from the leaves of pearl millet (Pennesitum typhoid's L.) by gel filtration, ion exchange and affinity chromatography.

A 200-fold purification was achieved having specific activity of 82 unit's mg of protein.

On SDS-P AGE, enzyme showed a single band of 68 kDa while gel filtration data displayed a molecular weight of 270 kDa, indicating the tetramer form of the enzyme.

The enzyme exhibited pH optima of 8.0 and an absolute requirement for a divalent metal ion, usually Mg2+ or Mn2+.

The enzyme showed hyperbolic response to increasing concentrations of Mg2+ or Mn2+ with Km values of 66.6 I-µM respectively.

Substantially lower enzyme activity was obtained with Ca2+and C02+.

The enzyme exhibited a substrate-dependent Michaelis-Menten kinetics having Km for L-malate and NADP+ being 91 µM and 28 µM respectively.

نمط استشهاد جمعية علماء النفس الأمريكية (APA)

al-Bassam, Badr Abd al-Rahman. 2000. Purification and characterizatiou'ofnadp-malic enzyme from pearl millet leaves. Saudi Journal of Biological Sciences،Vol. 7, no. 1, pp.30-38.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-240865

نمط استشهاد الجمعية الأمريكية للغات الحديثة (MLA)

al-Bassam, Badr Abd al-Rahman. Purification and characterizatiou'ofnadp-malic enzyme from pearl millet leaves. Saudi Journal of Biological Sciences Vol. 7, no. 1 (Jun. 2000), pp.30-38.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-240865

نمط استشهاد الجمعية الطبية الأمريكية (AMA)

al-Bassam, Badr Abd al-Rahman. Purification and characterizatiou'ofnadp-malic enzyme from pearl millet leaves. Saudi Journal of Biological Sciences. 2000. Vol. 7, no. 1, pp.30-38.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-240865

نوع البيانات

مقالات

لغة النص

الإنجليزية

الملاحظات

Includes bibliographical references : p 37

رقم السجل

BIM-240865