التشخيص الجزيئي لبكتريا E. colio157 : H7 المعزولة من براز أطفال مصابين بالإسهال باستخدام Multiplex polymerase chain reaction

العناوين الأخرى

Molecular diagnosis of e.cli0157: H7 which isolated from children with diarrhea by using multiplex PCR

المؤلفون المشاركون

شذى ذنون أحمد
آمنة نصيف جاسم
إياد محمد علي فاضل

المصدر

Baghdad Science Journal

الناشر

جامعة بغداد كلية العلوم للبنات

تاريخ النشر

2010-03-31

دولة النشر

العراق

عدد الصفحات

9

التخصصات الرئيسية

الأحياء
الطب البشري

الموضوعات

• علم الأحياء الدقيقة
• الطب
• التخمر
• المطهرات
• البكتيريا
• العفن
• الإسهال

الملخص العربي

معت 96 عينة برازا لأطفال مصابين بالإسهال الدموي من مستشفى أطفال العلوية و مستشفى المنصور التخصصي.

أجري المسح لجميع العينات للتحري و عزل بكتريا Escherichia coli o 157 : H7 و تمييزها عن باقي سلالات E.

Coli غير المخمرة للسوربتول Non–Sorbitol Fermenting Escherichia .(NSF E.

Coli (coli شخصت العزلات البكتيرية باستخدام طرائق التشخيص المظهري حيث زرعت العينات على وسط أغنائي سائل و حضنت بدرجة حرارية 37 م لمدة 24 ساعة تبعها الزرع على وسط Cefixime–Telluride CT-SMAC) Sorbitol Mac Coney Agar.) تم الحصول على 32 عزلة بكتيرية غير مخمرة للسوربتول شخص منها 11 عزلة E.

Coli و ذلك باستخدام الأختبارات الكيموحيوية التقليدية و نظام التسخيص API20E و التي لم تعط نتائج كافية تمكن من تفريق النمط المصلي O157 بشكل نهائي عن باقي عزلات NSF E.

Coli أجري أربع أختبارات كيموحيوية خاصة لتشخيص E.

Coli النمط المصلي O157 : H7 و تمييزه عن باقي NSF E.

Coli و أظهرت النتائج أن 3 عزلات فقط كانت من النمط O157 : H7، ثم أجري فحص التلازن بحبيبات اللاتكس المرتبطة بالأجسام المضادة للمستضدين O157 و H7 و أعطيت العزلات الثلاث نتيجة إيجابية مع كلا العدتين.

شخصت العزلات باستعمال تقنية التفاعل التضاعفي المتعدد لسلسلة الدنا (Multiplex Polymerase Chain Reaction) (MPCR) للكشف عن وجود أو غياب أربعة أنواع من الجينات هي Stx1 و Stx2 و hlyA و eaeA المشفرة لعوامل ضراوة رئيسية لتشخيص بكتريا E.

Coli O157 : H7 المعزولة و ذلك باستخدام بادئات نوعية تستهدف مواقع متخصصة للجينات الهدف المذكورة آنفا و في تفاعل واحد، و أظهرت النتائج وجود تباين في المحتوى الجيني بين عزلات بكتريا E.

coli O157 : H7 حيث احتوت أحدى العزلات على الجينات الأربعة بينما احتوت العزلتان الأخريتان على ثلاثة جينات هي Stx2 و hlyA وeaeA .

الملخص الإنجليزي

A total of 96 stool samples were collected from children with bloody diarrhea from two hospitals in Baghdad.

All samples were surveyed and examined for the presence of the Escherichia coli O157:H7 and differentiate it from other Non -Sorbitol Fermenting Escherichia coli (NSF E.

coli).

The Bacterial isolates were identifed by using morphological diagnostic methods, Samples were cultured on liquid enrichment medium, incubated at 37C° for 24 hrs, and then cultured on Cefixime Tellurite -Sorbitol MacConkey Agar (CT- SMAC).

32 non-sorbitol fermenting bacterial isolates were obtained of which 11 were identified as Escherichia coli by using traditional biochemical tests and API20E diagnostic system without differentiation between serotype O157:H7 and other NSF E.

coli isolates .

Four special biochemical tests were done for serotype O157:H7 differentiation from other NSF bacteria.

Only 3 isolates belonging to the serotype O157:H7 were obtained .

Latex agglutination test for O157 and H7 showed that the 3 isolates gave positive results with both tests.

The Bacterial isolates were identifed by using Multiplex Polymerase Chain Reaction (MPCR) technology for the presence or absence of 4 genes (Stx1, Stx2, hlyA and eaeA) that encode for main virulence factors to diagnose E.

coli O157:H7 isolated By using specific primers in MPCR .

The result showed that one E.

coli O157:H7 isolates contain all 4 genes , other isolates contain 3 genes: Stx2, hlyA & eaeA

نوع البيانات

أوراق مؤتمرات

رقم السجل

BIM-257086

• APA
• MLA
• AMA