تحديد الظروف المثلى لتقييد أنزيم glucose isomerase على المبادل الأيوني DEAE-sephadex-A50

الملخص AR

استخدم المبادل الأيوني DEAE-Sephadex-A50 لتقييد إنزيم الكلوكوزايزوميريز المنقى و المنتج من العزلة المحلية Actinoplanes sp.

89ST27، إذ درست الظروف المثلى (الرقم الهيدروجيني و تركيز الإنزيم و مدة التقييد و تركيز المبادل) لعملية التقييد، بينت النتائج أن الإنزيم المقيد بدارئ كلايسين-هيدروكسيد الصوديوم ذو الرقم الهيدروجيني 9قد أعطى فعالية أنزيمية أعلى (1.02 وحدة / مليلتر) من الإنزيم المقيد بدارئ فوسفات الصوديوم ذو الرقم الهيدروجيني 7.2، و أن استخدام 2.4 وحدة من الإنزيم أعطت أفضل نسبة مئوية (48.83%) لفعالية الإنزيم المقيد.

كما أظهرت النتائج أن أفضل تقييد للإنزيم حصل بعد 60دقيقة من مزج 2.

4 وحدة من الإنزيم مع 1 مليلتر من محلول المبادل الأيوني ذو تركيز 1%، و أن الإنزيم المقيد أظهر فعالية أنزيمية مقدارها 1.41-1.36 وحدة / مليلتر و بنسبة استرداد تراوحت بين 64.4-62.2 %.

درس تأثير مدة الحضن و درجة الحرارة على فعالية الإنزيم المقيد، إذ بينت النتائج آن الإنزيم المقيد أعطى أعلى فعالية أنزيمية بعد 60 دقيقة من حضنه بدرجة حرارة 80°م.

خزن الإنزيم المقيد لمدة 35 يوم بدرجة حرارة 4°م لمعرفة مدى احتفاظه بالفعالية الأنزيمية، وجد أن الإنزيم المقيد احتفظ بحوالي 51.1% من فعاليته الأنزيمية بعد مرور 30 يوما من خزنه بدرجة 4°م.