تحديد دور البلازميدات في إنتاج البكتريوسين من الكلبسيلا المرضية

الملخص AR

جمعت 125 عينة (50 عينة حروق و جروح و 75 عينة دم) من المرضى الراقدين و المراجعين لمستشفيات (ابن البلدي و الكندي) في بغداد و للفترة 1/ 11 / 2010 إلى 1 / 3 / 2011.

عزلت 40 عزلة بكتيرية منها 18 عزلة أعطيت صفات مشابهة لبكتيريا الكلبسيلا اعتمادا على الصفات المظهرية و التشخيص الكيموحيوي و استعمال نظام AP1 E20 مع استعمال نظام VTTEK2.

تم غربلة جميع العزلات المشخصة في قابليتها على إنتاج البكتريوسين بإتباع طريقة أراق الاكار.

حيث كانت نتائج استعمال طريقة أقراص الاكار 7 عزلات من مجموع 18 عزلة ذات قابلية في إنتاج البكتريوسين.

درس المحتوى البلازميدي لجميع عزلات بكتيريا الكلبسيلا المنتجة للبكتريوسين و البالغ عددها 7 عزلات.

أظهر النتائج احتواء بعض العزلات على عزلة كروموسومية و أخرى بلازميدية أما البعض الآخر فقد احتوى على حزمة كروموسومية فقط.

و لغرض تحديد دور البلازميدات في إنتاج البكتريوسين فقد انتخب عزلتين لإجراء عملية تحديد البلازميدات و هما Klebsiella terrigena 6 و Klebsiella terrigena 7 الأكثر إنتاجا للبكتريوسين و باستعمال صبغة بروميد الاثيديوم.

أظهرت النتائج أن صبغة بروميد الاثيديوم بتركيز 512 مايكروغرام / مليلتر قد ساعد على إزالة البلازميد من العزلتين المنتخبتين إضافة إلى فقدان قابليتهما على إنتاج البكتريوسين، مما يدل على أن الجين المسؤول عن إنتاج البكتريوسين هو بلازميدي الموقع و لتأكيد هذه النتيجة فقد أجريت عملية التحول الوراثي و ذلك بنقل البلازميد المستخلص من العزلة Klebsiella terrigena 7 إلى عزلة E.coli MM 294rif + الخالية من البلازميدات.

أظهرت النتائج أن العزلة E.coli MM 294rif + أصبحت مقاومة للامبسلين بعد أن كانت حساسة له إضافة إلى أنها أصبحت منتجة للبكتريوسين.

مما يؤكد أن البلازميد يحمل الجين المسؤول عن إنتاج البكتريوسين.