خفض الكولسترول باستخدام إنزيم الكولسترول أوكسديز المنتج من عزلة محلية لبكتريا bacillus subtilis

العناوين الأخرى

Decrease of cholesterol by cholesterol oxidase produced from a local isolate of bacillus subtilis

مقدم أطروحة جامعية

إِلهام كاظم ناصر

مشرف أطروحة جامعية

مجيد، غياث حميد

الجامعة

جامعة البصرة

الكلية

كلية الزراعة

القسم الأكاديمي

قسم علوم الأغذية و التقانات الإحيائية

دولة الجامعة

العراق

الدرجة العلمية

ماجستير

تاريخ الدرجة العلمية

2012

الملخص العربي

عزلت 12عزلة تابعة لجنس Bacillus من عينات شملت التربة و الجبن و القيمر و اللبن الرائب المجفف و اللبن الرائب الناشف و الحنطة.

شخصت العزلات حسب الصفات المظهرية والفحوصات الكيموحيوية، و أوضحت النتائج أنها تعود إلى أنواع من بكتريا Bacillus و هي ثلاث عزلات By0 Br3 , Bs0, تمثل Bacillus cereus، و ثلاث عزلات Bc1, Bc3, Br4 تمثل Bacillus sublilis و العزلات Bc2, Bw0 كانت تمثل Bacillus coagulans، أما العزلة Br1 فقد كانت B.

megaterium و العزلة Br2 كانت B .alvei، فيما كانت العزلة By1 B.

licheniformis.

أوضحت نتائج الغربلة الأولية بان العزلة Bc3 كانت الاكفا في إنتاج إنزيم الكولسترول اوكسديز COB.

كانت الظروف المثلى لإنتاج إنزيم COB من العزلة المحلية Bc3 كما يلي : - 2 % سكر الكلوكوز مصدر كاربوني. - 0,15 كبريتات الامونيوم مصدر نتروجيني.

- 7 الدالة الحامضية الابتدائية.

- 35م درجة الحرارة لحضن وسط الإنتاج .

- 1,75مل حجم لقاح و بمعدل 3,5% - 150 هزة / دقيقة سرعة الحاضنة الهزازة.

- 0,2 % تركيز كولسترول لإنتاج الإنزيم - 24 ساعة مدة الحضن.

تمت تنقية الإنزيم وفق خطوات التنقية و التي تضمنت الترسيب بكبريتات الامونيوم و بنسبة إشباع 70 % إذ بلغت الفعالية الإنزيمية 16,66وحدة / مل وبفعالية نوعية 111,07وحدة / ملغم بروتين و استكملت التنقية بالترشيح الهلامي باستعمال العمود سيفادكس G-100 إذ ظهرت أربع قمم بروتينية و كانت القمة الرابعة ذات فعالية إنزيمية 6,5 وحدة / مل، و بفعالية نوعية 162,5وحدة / ملغم بروتين و كانت عدد مرات التنقية 4,31 و بحصيلة إنزيمية مقدارها 1,4 %.

و للتأكد من نقاوة الإنزيم أجري الترحيل الكهربائي و أوضحت النتائج ظهور حزمة بروتينية واحدة في هلام متعدد الاكريل أمايد.

درست صفات الإنزيم المنقى فقد قدر الوزن الجزيئي لإنزيم الكولسترول الاوكسديز المنتج من العزلة Bc3 بتقنية الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الاكريل امايد وبوجود SDS و كان 60 كيلو دالتون.

و بينت النتائج أن الدالة الحامضية المثلى لفعالية الإنزيم المنقى هي 7 إذ أعطى الإنزيم أعلى فعالية إنزيمية مقدارها 80 وحدة / مل.

و بلغت الدرجة الحرارية المثلى لفعالية الإنزيم المنقى 50 مْ و بفعالية إنزيمية 106,72 وحدة / مل.

أما الدالة الحامضية المثلى لثبات الإنزيم فقد تراوحت بين 6-9 فقد احتفظ الإنزيم لكامل فعاليته عند هذا المدى للدوال الحامضية.

و كان الثبات الحراري للإنزيم عند مدى حراري تراوح بين 40-60مْ. درست الثوابت الحركية للإنزيم و أوضحت النتائج أن قيم ثابت ميكالس Km للإنزيم بلغت 14,2 مايكرومول و بلغت السرعة القصوى Vmax 0,03 مايكرومول / دقيقة.

أثبتت النتائج قابلية الإنزيم العالية على خفض الكولسترول في الحليب فقد انخفضت نسبة الكولسترول إلى 3,577 ملغم / 100مل مقارنة مع 15,035 ملغم / 100مل للحليب غير المعامل بالإنزيم.

استعمل الإنزيم في صناعة اللبن الرائب لدراسة مدى إمكانيته في خفض الكولسترول في المنتوج النهائي.

أوضحت النتائج قابلية الإنزيم العالية في خفض الكولسترول في اللبن الرائب حيث انخفضت نسبة الكولسترول من 16,648 في الحليب المعد في الصناعة إلى 3,013 ملغم / 100 مل باستخدام 0,25 وحدة / مل من الإنزيم .

لم تختلف درجات التقييم الحسي اللبن الرائب المصنع من الحليب المسترجع و الذي أضيف إليه الإنزيم بتركيز 0,25 وحدة /100 مل حليب عن معاملة السيطرة فيما يتعلق بالصفات الحسية و التي شملت النكهة و اللون و القوام.

التخصصات الرئيسية

التغذية والحميات

الموضوعات

• علم الأحياء الدقيقة
• الكيمياء الحيوية
• التخمر
• المطهرات
• البكتيريا
• الكوليسترول
• العفن

عدد الصفحات

130

قائمة المحتويات

• APA
• MLA
• AMA

لغة النص

العربية

نوع البيانات

رسائل جامعية

رقم السجل

BIM-317297