استعمال تقنية الإيلايزا في كشف التلوث الفطري لمعجون الطماطة

الملخص AR

استعمال الفحص المناعي الأنزيمي الإيلايزا النوع الغير المباشر في قياس معيار الأجسام المضادة في الأمصال المحضرة ضد الفطريات Rhizopusstolonifer ! Aspergillusflavus.

استعمل المصل المضاد المرتبط بأنزيم الهيدروكسيدز (Goat Anti-IgG-Horse Radish proxidas) Anti-IgG-HRP إذ بلغ معيار الأجسام المضادة لكل من الفطر R.stolonifer ! A.flavus 160/ 1 و 80 / 1 على التوالي.

تم تحضير المقترن لكل من الفطر R.stolonifer ! A.flavus و ذلك بربط المصل المحض ضد كل منها (بعد ترسيبه بكبريتات الأمونيوم) بأنزيم الفوسفاتيز القاعدي (Alkaline phosphatase) و تم تقدير أفضل تخفيف للمقترن المحضر ضد الفطر A.flavus10 : 1 و للفطر R.stolonifer 5 : 1.

استعمل فحص الإيلايزا نوع Double-sandwich للكشف عن تراكيز معينة من الفطرR.stolonifer و A.flavus أو خلاصتهما في محلول داريء الكربونات ذي الرقم الهيدروجيني 9.5 و هي 25، 1.5، 12.5، 3.125، 6.25، 0.78، 0.39 مايكروغرام لكل مليلتر كما استعمل فحص الإيلايزا للكشف عن ثلاث تراكيز من الفطرين المشار لهما هي 1، 2، 3 مايكروغرام لكل مليلتر في نموذج معجون الطماطة المخفف 1 : 5 بالمحلول المنظم PBS.

و أظهرت النتائج ان قيم الامتصاص الضوئي لتركيز الفطر في محلول دارئ الكربونات أعلى مما هو عليه في نموذج معجون الطماطة كما أظهرت النتائج بأن هناك علاقة طردية بين تركيز الفطر المضاف و قيم الامتصاص الضوئي و أظهرت أيضا وجود فروقات عالية المعنوية عندالكشف عن الفطر في معجون الطماطة و بمقارنة فحص الإيلايزا مع طريقة الزرع بالأطباق التي استعملت للكشف عن التراكيز الفطرية نفسها في نموذج معجون الطماطة.