Purification, characterization and antifungal activity of chitinase from Serratia marcescens isolated from fresh vegetables

الملخص AR

تم الحصول على 7 عزلات (بنسبة % 35)، و 5 عزلات (بنسبة 35 %) تعود لبكرا Serratia marcescens من مجموع 20 عينة لنبات الخس، و 20 عينة لنبات السبانج، على التوالي، مأخوذة من مواقع مختلفة في مزرعة في مدينة بغداد.

اختيرت لعزلة التي أنتجت الكايتينيز بأعلى مستوى لاستخلاص و تقنية إنزيم الكايتينز بعدة مراحل تتضمن الترسيب بكبريتات الامونيوم، و لتبادل الأيوني باستخدام DEAE-Sephadex، و الترشيح الهلامي باستخدام 200-Sehadex G بعدد مرت تقنية 89.5 و بحصيلة نهائية % 30.

تم توصف إنزيم الكايتينير المنقى و وجد أن وزنه الجزيئي بحدود 59000 دالتون باستخدام كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي.

و قد وجد أن الرقم الهيدروجيني الأمثل و درجة الحرارة المثلى لفعالية الإنزيم المنقى هي 6.0 و 50 م، على التوالي، و وجد أن الإنزيم المنقى مستقر في الرقم الهيدروجيني المتراوح 5-7و درجة الحرارة تصاعديا إلى 50 م.

تم تنشيط أنزيم الكايتينيز بوجود2 Mg+ +Ca+2 Cu+2 Mg، و ثبطت فعاليته بوجود Hg+2.

فضلا عن ذلك وجد أن 100× Trironو –n ethylmaleimide أدت إلى زيادة فعالية إنزيم الكايتينيز، أما EDTA، الميثانول، الايثانول و الاسيتون فأدت إلى تثبيط الفعالية و هذه النتيجة تؤكد أن أنزيم الكايتينيز هو إنزيم معدني.

كذلك أظهر إنزيم الكايتينيز أعلى فعالية تثبيطة لفطر Fusarium solani بالمقارنة مع فطر Aspergillus Flavus و بنسبة تثبيط 83 و 69 % على التوالي.

لذا أدى هذا البحث إلى زيادة الفائدة باستخدام الكايتينيز عامل سيطرة بايولوجية للفطريات و الحشرات الممرضة للنبات، إنتاج سكريات بسيطة كايتينية، تحضير البروتوبلاست و السفيروبلاست من الخمائر و أعفان و تحويل المخلفات الكايتينية، تحضير البروتوبلاست من الخمائر و أعفان و تحويل المخلفات الكايتينية إلى بروتين أحادي الخلية لتغذية الحيوانات.