استخلاص و تنقية البروتين المرتبط بالفايبرونكتين من بكتريا المكورات العنقودية الذهبية

الملخص AR

تم استخلاص وتنقیة البروتین المرتبط بالفایبرونكتین من الجدار الخلوي لبكتریا المكورات العنقودیة الذهبیة (Staphylococcus aureus).

إذ انتخبت ٦ عزلات بكتیریة من مجموع (30) عزلة تم الحصول علیها من مختبرات مدینة الطب، و مختبر الصحة العامة و قسم التقنیات الإحیائیة في كلیة العلوم / جامعة بغداد، و أجریت على هذه العزلات كافة الاختبارات التشخیصیة و التأكیدیة لغرض التأكد من نقاوتها و قدرتها على إنتاج البروتین المرتبط بالفایبرونكتین. استخلص البروتین بنبذ العالق البكتیري في جهاز المنبذة المبردة (Cooling centrifuge) و تكسير الخلايا البكترية بالموجات فوق الصوتیة بوساطة جهاز التكسیر الكهربائي (Sonicator)، ركز المستخلص البروتیني بوساطة كبریتات الأمونیوم و من ثم بعملیة الدیلزة و الترشیح الفائق لغرض التخلص من أكبر نسبة ممكنة من الأملاح و الشوائب الموجودة في المحلول. نقي المستخلص البروتیني بوساطة كروموتوغرافیا الترشیح الهلامي على عمود هلام السیفاكریل S-200 إذ انفصلت قمتان بعد قراءة المستخلص الناتج على طول موجي ٢٨٠ نانومیتر، تم التأكد من نقاوة بروتین الالتصاق السطحي و ذلك بظهور حزمة واحدة عند أجراء الترحیل الكهربائي في هلام الاكریل اماید المتعدد بوجود المواد الماسخة SDS.

و بينت نتائج توصيف البروتين إن الوزن الجزیئي بطریقة الترشیح الهلامي و الترحیل الكهربائي على هلام الاكریل اماید المتعدد و بوجود المواد الماسخة للبروتین SDS و مركبتوایثانول فقد قدر الوزن الجزیئي في هذه الحالة بمقدار (59000) و (58000) دالتون و تبین من خلال مطابقة الوزن الجزیئي للبروتین مع الأوزان الجزیئیة للبروتینات القیاسیة إن البروتین هو البروتین المرتبط بالفایبرونكتین .