![](/images/graphics-bg.png)
A Nonradioactive Fluorimetric SPE-Based Ceramide Kinase Assay Using NBD-C6-Ceramide
المؤلفون المشاركون
Van Veldhoven, Paul P.
Van Overloop, Helena
Van der Hoeven, Gerd
المصدر
العدد
المجلد 2012، العدد 2012 (31 ديسمبر/كانون الأول 2012)، ص ص. 1-9، 9ص.
الناشر
Hindawi Publishing Corporation
تاريخ النشر
2012-07-26
دولة النشر
مصر
عدد الصفحات
9
التخصصات الرئيسية
الملخص EN
Ceramide kinase (CERK) has been implicated in important cellular processes such as inflammation and apoptosis.
Its activity is usually measured using radiolabeled ceramide or [γ-32P]-ATP, followed by extraction, thin-layer chromatography, and detection of the formed labeled ceramide-1-phosphate.
To eliminate the use of radioactivity, we developed similarly but independently from the approach by Don and Rosen (2008), a fluorescence-based ceramide kinase assay, using N-[7-(4-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazole)]-6-aminohexanoyl-sphingenine (NBD-C6-ceramide) as substrate.
Its Km value (4 μM) was comparable to that of N-hexanoyl-sphingenine (C6-ceramide).
The produced fluorescent NBD-C6-ceramide-1-phosphate was captured by means of solid-phase extraction on an aminopropyl phase, resulting in a fast and sensitive CERK measurement.
By performing this assay in a 96-well format, it is also suitable for high-throughput screening (HTS) to search for CERK modulators.
A limited screen revealed that some protein kinase inhibitors (e.g., U-0126; IC50 4 μM) and ceramide analogues (e.g., fenretinide, AMG-9810; IC50 1.1 μM) affect CERK in vitro.
نمط استشهاد جمعية علماء النفس الأمريكية (APA)
Van Overloop, Helena& Van der Hoeven, Gerd& Van Veldhoven, Paul P.. 2012. A Nonradioactive Fluorimetric SPE-Based Ceramide Kinase Assay Using NBD-C6-Ceramide. Journal of Lipids،Vol. 2012, no. 2012, pp.1-9.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-469377
نمط استشهاد الجمعية الأمريكية للغات الحديثة (MLA)
Van Overloop, Helena…[et al.]. A Nonradioactive Fluorimetric SPE-Based Ceramide Kinase Assay Using NBD-C6-Ceramide. Journal of Lipids No. 2012 (2012), pp.1-9.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-469377
نمط استشهاد الجمعية الطبية الأمريكية (AMA)
Van Overloop, Helena& Van der Hoeven, Gerd& Van Veldhoven, Paul P.. A Nonradioactive Fluorimetric SPE-Based Ceramide Kinase Assay Using NBD-C6-Ceramide. Journal of Lipids. 2012. Vol. 2012, no. 2012, pp.1-9.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-469377
نوع البيانات
مقالات
لغة النص
الإنجليزية
الملاحظات
Includes bibliographical references
رقم السجل
BIM-469377
قاعدة معامل التأثير والاستشهادات المرجعية العربي "ارسيف Arcif"
أضخم قاعدة بيانات عربية للاستشهادات المرجعية للمجلات العلمية المحكمة الصادرة في العالم العربي
![](/images/ebook-kashef.png)
تقوم هذه الخدمة بالتحقق من التشابه أو الانتحال في الأبحاث والمقالات العلمية والأطروحات الجامعية والكتب والأبحاث باللغة العربية، وتحديد درجة التشابه أو أصالة الأعمال البحثية وحماية ملكيتها الفكرية. تعرف اكثر
![](/images/kashef-image.png)