Pyrifcation and characterization two alkaline posphatases from camel small intestine

Abstract AR

تمت تنقية و دراسة خواص إنزيم الفوسفاتيز القلوي من الأمعاء الدقيقة للجمل.

و قد أجريت تنقية الإنزيم باستخدام الفصل الكروماتوجرافي على عمود ثنائي إيثيل أمينو إيثيل سليلوز، و قد تم فصل خمسة أيزوأنزيمات من الفوسفاتيز القلوي (IPA1 إلى IPA5)، ثم تنقية اثنين من الأيزوإنزيمات المفصولة لها أعلى نشاط للإنزيم و هما IPA2، IPA5 إلى درجة التجانس على عمود السيفاكريل إس -200.

و قد تم تقدير الوزن الجزيئي لإنزيمات الفوسفاتيز القلوي IPA2 و IPA5 باستخدام عمود السيفاكريل إس -200 حيث بلغت 36000 و 49800 دالتون، على التوالي و قد تم تأكيد هذه النتائج بواسطة جل البولي أكريلميد–كبريتات دودوسيل الصوديوم و كانت قيمتها 3500 و 4900 دالتون لل IPA2، IPA5 على التوالي.

كما أوضح الجل أن كلا من الإنزيمين يتكون من وحدة واحدة.

كما تم تقدير نقط التعادل الكهربي لهما و كانت 5,4 و 5,7 كما كانت قيم ثابت ميكائيل لهما 0,26 0,34 ميكرومول بارا-نيتروفينيل فوسفات / مللي على التوالي.

و قد وجد أن الأنزيمين يشتركان في نفس الخاصية و هي أن لهما قابلية أعلى تجاه البارا-نيتروفينيل فوسفات، 1- نافثيل فوسفات بالمقارنة بالمواد الوسيطة الأخرى المختبرة.

كما تبين أن الأس الهيدروجيني الأمثل للأيزوإنزيمات IPA2، IPA5 هو 10,0 و 10,5 و درجة الحرارة المثلى عند 50 °م و 40 °م، على التوالي.

و كذلك تم تقدير طاقة التنشيط للإنزيمين و كانت 9,3 و 9,6 كيلو سعر لكل لمول، على التوالي.

و قد دلت الدراسة الثباتية للحرارة على ثبات الإنزيمين حتى درجة 40 °م، 50 °5، على التوالي.

كما تم دراسة الكاتيونات الفلزية و المثبطات على نشاط الإنزيم، و قد دلت النتائج على إنزيمي الفوسفاتيز القلوي IPA2، IPA5 من الأمعاء الدقيقة للجمل يتم تثبيطهما بمركبات الإيثيلين داي أمين تترا أسيتك أسيد و الفينيل الأنين.