Isolation and identification of cholesterol oxidase producing Pseudomonas aeruginosa
Other Title(s)
عزل و تشخيص بكتريا Pseudomonas aeruginosa المنتجة لإنزيم كولسترول أوكسيديز
Joint Authors
Jasim, Hamid Majid
Diwan, Saddam Yahya
Source
Issue
Vol. 51, Issue 2 (30 Jun. 2010)6 p.
Publisher
University of Baghdad College of Science
Publication Date
2010-06-30
Country of Publication
Iraq
No. of Pages
6
Main Subjects
Topics
Abstract AR
يعد إنزيم كولسترول أوكسيديز من الإنزيمات المهمة اقتصاديا في تطبيقات التحول الحيوي في التقديرات السريرية لكولسترول مصل الدم الكلي و الحر و في الصناعات الغذائية، لذا فقد هدفت هذه الدراسة إلى عزل بكتريا Pseudomonas aeruginosa منتجة لإنزيم كولسترول أوكسيديز من مصادر محلية مختلفة و ذلك بأخذ 55 مسحة من نماذج سريرية مختلفة شملت عينات الأذن و الأدار و الحروق و الجروح و القشع بالإضافة إلى 35 عينة بيئية مختلفة جمعت من التربة و المياه من مواقع مختلفة في محافظة بغداد، و قد تم الحصول على 115 عزلة بكتيرية من هذه النماذج شخصت 60 عزلة منها على أنها P.
aeruginosa على ضوء نتائج الاختبارات الكيموحيوية و نظام التشخيص باستخدام العدة التشخيصية Api20E.
درست قابلية هذه العزلات على إنتاج إنزيم كولسترول أوكسيديز، و قد أشارت النتائج إلى إن جميع هذه العزلات كانت منتجة للإنزيم و بدرجات متفاوتة، تميزت من بينها العزلة P.
aeruginosa H48 بكفاءتها العالية في إنتاج الأنزيم، حيث بلغت فعالية الإنزيم في رائق مزرعتها البكترية 1.17 وحدة / مل.
تم تنقية إنزيم كولسترول أوكسيديز المنتج من العزلة P.
aeruginosa H48 بالترسيب أولا باستخدام كبريتات الامونيوم بنسبة إشباع 70%، ثم الديلزة، ثم التنقية بالتنادل الأيوني باستخدام المبادل كاربوكسي مثيل سليلوز، و قد بلغت فعالية الإنزيم المنقى بعد هذه الخطوات 3.87 وحدة / مليلتر.
قدر الرقم الهيدروجيني الأمثل و الدرجة الحرارية المثلى الإنزيم لفعالية و ثبات الإنزيم، و قد أشارت النتائج إلى إن الرقم الهيدروجيني الأمثل لفعالية و ثبات الإنزيم هو 7.0 و 6.5 على التوالي، بينما كانت الدرجة الحرارية المثلى لفعالية و ثبات الإنزيم 35 و 37 م على التوالي.
Abstract EN
Cholesterol oxidase (EC : 1.
1.
3.
6) is industrially and commercially important for the application in bioconversions for clinical determination of total or free serum cholesterol, and in food industry, for this reason this study was aimed to isolate cholesterol oxidase producing Pseudomonas aeruginosa from different local sources, by taking 55 swap samples from different serological samples includes ears, urine, burns, wounds and sputum, in addition to another 35 environmental samples collected from soil and water from different locations in Baghdad governorate.
From these samples 115 bacterial isolate were obtained, and among them only 60 isolate were identified as P.
aeruginosa according to the results of biochemical tests and Api 20E system.
Ability of these isolates in cholesterol oxidase production was screened in Lauria-Broth medium.
Results showed that all of these 60 isolates were able to produce cholesterol oxidase with variable capacities, among them P.aeruginosa H48 was the most efficient isolate in enzyme production.
The activity of crude enzyme in culture filtrate of this isolate was 1.71 U / ml.
Cholesterol oxidase produced by P.aeruginosa H48 was purified by ammonium sulphate precipitation (70 % saturation), dialysis and ion exchange chromatography using CM cellulose.
The enzyme activity of the partially purified enzyme was increased to 3.
87 U / ml.
Optimum pH and temperature for activity and stability of the partially purified enzyme were estimated.
Results showed that the Optimum pH for enzyme activity and stability was pH7.
0 and pH 6.5 respectively, while the optimum temperature for enzyme activity and stability was 35 and 37 °C respectively.
American Psychological Association (APA)
Jasim, Hamid Majid& Diwan, Saddam Yahya. 2010. Isolation and identification of cholesterol oxidase producing Pseudomonas aeruginosa. Iraqi Journal of Science،Vol. 51, no. 2.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-309233
Modern Language Association (MLA)
Jasim, Hamid Majid& Diwan, Saddam Yahya. Isolation and identification of cholesterol oxidase producing Pseudomonas aeruginosa. Iraqi Journal of Science Vol. 51, no. 2 (2010).
https://search.emarefa.net/detail/BIM-309233
American Medical Association (AMA)
Jasim, Hamid Majid& Diwan, Saddam Yahya. Isolation and identification of cholesterol oxidase producing Pseudomonas aeruginosa. Iraqi Journal of Science. 2010. Vol. 51, no. 2.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-309233
Data Type
Journal Articles
Language
English
Notes
Includes bibliographical references
Record ID
BIM-309233