![](/images/graphics-bg.png)
Cryopreservation of immature buffalo oocytes by vitrification
Other Title(s)
تجميد بويضات الجاموس الغير ناضجة بالتزجج
Joint Authors
Badr, Majdi Ramadan
Darwish, Jamal Mustafa
al-Badri, Diya al-Din Abd al-Mumin
Source
Assiut Veterinary Medical Journal
Issue
Vol. 54, Issue 117 (30 Apr. 2008), pp.397-412, 16 p.
Publisher
Assiut University Faculty of Veterinary Medicine
Publication Date
2008-04-30
Country of Publication
Egypt
No. of Pages
16
Main Subjects
Topics
Abstract AR
تعتبر عملية تجميد بويضات الحيوانات الغير ناضجة و استخدامها بعد الإسالة لإنتاج أجنة صالحة للنقل للام المستقبلية من أهم الوسائل الحديثة للحفاظ على الصفات الوراثية الممتازة.
و بالرغم من ذلك ما زالت طرق تجميد البويضات الغير ناضجة تعطي نتائج ضعيفة مقارنة بطرق تجميد الأجنة.
و لهذا تهدف الدراسة الحالية إلى دراسة بعض العوامل التي قد تؤثر في نجاح عملية تجميد البويضات مثل تحديد أحسن تركيز من الاثيلين جليكول (10، 20، 40 %) في محلول الاتزان قبل وضع البويضات في محلول التجميد النهائي (محلول التزجج) و كذلك انسب وقت لتحضين البويضات في محلول الاتزان (3،5، 10 دقيقة) قبل وضعها في محلول التزجج النهائي و كذلك دراسة تأثير إضافة السكروز و التريهالوز و الميثيل سلفوكسيد إلى محلول التزجج لدراسة تأثير هده العوامل على الشكل الظاهري للبويضات بعد الإسالة و قدرتها على النضوج و الإخصاب و النمو معمليا.
و لقد أوضحت نتائج الدراسة الحالية إن محلول الاتزان و وقت الاتزان يؤثران تأثيرا معنويا كبيرا على الشكل الظاهري للبويضات بعد التجميد و الإسالة.
فلقد تبين من نتائج الدراسة الحالية أن استخدام تركيز 20 % من الاثلين جليكول في محلول الاتزان و تحضين البويضات في محلول الاتزان لمدة 5 دقائق مع إضافة السكروز إلى محلول التزجج أدى إلى استخلاص أعلى معدل للبويضات السليمة ظاهريا (93.73 %) و أقل معدل للبويضات الغير سليمة من الناحية الظاهرية (6.11 %).
كما أوضحت نتائج الدراسة الحالية أن تزجج بويضات الجاموس الغير ناضجة في محلول التزجج الذي يحتوي على السكروز أو التريهالوز أو الميثيل سلفوكسيد نتج عنه انخفاض معنوي كبير في معدل النضوج (47.27، 26.92، 42.03 % على التوالي) و إخصاب البويضات (30.36، 13.21، 23.08 % على التوالي) و انقسام الأجنة معمليا (23.91، 6.67، 21.43 % على التوالي) و معدل نمو الأجنة إلى الطور التوتي (4.35، 0.00، 2.38 % على التوالي) مقارنة بالمجموعة الضابطة (78.67، 58.36، 44.64، 19.64 % على التوالي).
كذلك أوضحت نتائج الدراسة الحالية أن جميع البويضات المزججة لم تنمو إلى طور البلاستوست مقارنة بالمجموعة الضابطة (10.71 %).
و لهذا يمكن أن نستنج من هذه الدراسة أن بويضات الجاموس الغير ناضجة يمكن إن تحفظ بطريقة التزجج و يتضح ذلك من المحافظة على الشكل الظاهري للبويضات و قدرتها على النمو معمليا.
كما يتضح من الدراسة الحالية أن أحسن طريقة لتزجج بويضات الجاموس الغير ناضجة هي وضع البويضات الغير ناضجة في محلول الاتزان الذي يحتوي على 20 % ايثلين جليكول لمدة 5 دقائق و محلول التزجج 20 % اثيلين جليكول و 0.5 مول سكروز.
و لكن لا يزال مطلوب إجراء العديد من الدراسات لتحسين معدلات نمو الأجنة معمليا من البويضات المجمدة.
Abstract EN
Cryopreservation of collected oocytes from slaughtered animals of high genetic value, for production of embryos may provide an opportunity to replenish the valuable germplasm lost.
The aim of this study was to cryopreserve the immature buffalo oocytes by vitrification.
Experiments were conducted to study the effect of using different ethylene glycol concentrations (10, 20 and 40 %) in the equilibration solution, equilibration periods (3, 5 and 10 min) and vitrification solutions (ethylene glycol with 0.5 M sucrose, 0.3 M trehalose and 20 % dimethyl sulfoxide) with a non vitrified group served as control on morphological survival, in vitro maturation and embryo development of vitrified-warmed immature buffalo oocytes.
The selected cumulus oocyte complexes with compacted cumulus cells and evenly granulated ooplasm were vitrified.
The present results revealed that, equilibration solution and equilibration time significantly (P < 0.01) decreased the proportion of morphologically normal oocytes.
Using sucrose in the vitrification solution, an equilibration time of 5 min and an equilibration solution with 20 % ethylene glycol (EG) yielded the highest proportion of morphologically normal oocytes (93.73 %) and the lowest proportion of morphologically abnormal oocytes (6.11 %).
Moreover, vitrification of buffalo oocytes with different vitrification solutions, sucrose, trehalose or DMSO, significantly (P < 0.5) decreased the in vitro maturation rate (47.27, 26.92 and 42.03 %, respectively), in vitro fertilization rate (30.36, 13.21 and 23.08 %, respectively), cleavage rate (23.91, 6.67 and 21.43 %, respectively) and morula development (4.35, 0.00 and 2.38 %, respectively) compared to the control treatment (78.67, 58.73,44.64 and 19.64 %, respectively).
The current results also showed that, all the oocytes that vitrified in different vitrification solutions failed to develop to the blastocyst stage compared to the control treatment (10.71 %).
Therefore, from the current results we can conclude that immature buffalo oocytes could be frozen by vitrification technique.
Acceptable vitrification protocol of immature buffalo oocytes was observed when immature buffalo oocytes were vitrified using 20 % EG in the quilibration solution, an equilibration time of 5 min, and a vitrification solution containing 20% EG and 0.5 M sucrose.
However, further studies are needed to improve the in vitro embryo development of the vitrified buffalo oocytes.
American Psychological Association (APA)
Badr, Majdi Ramadan& Darwish, Jamal Mustafa& al-Badri, Diya al-Din Abd al-Mumin. 2008. Cryopreservation of immature buffalo oocytes by vitrification. Assiut Veterinary Medical Journal،Vol. 54, no. 117, pp.397-412.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-32612
Modern Language Association (MLA)
Badr, Majdi Ramadan…[et al.]. Cryopreservation of immature buffalo oocytes by vitrification. Assiut Veterinary Medical Journal Vol. 54, no. 117 (Apr. 2008), pp.397-412.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-32612
American Medical Association (AMA)
Badr, Majdi Ramadan& Darwish, Jamal Mustafa& al-Badri, Diya al-Din Abd al-Mumin. Cryopreservation of immature buffalo oocytes by vitrification. Assiut Veterinary Medical Journal. 2008. Vol. 54, no. 117, pp.397-412.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-32612
Data Type
Journal Articles
Language
English
Notes
Includes bibliographical references : p. 408-412
Record ID
BIM-32612