فصل و تنقية و توصيف جزئي للايسوزايم من زهرة القرنابيط

Abstract AR

جرى في هذه الدراسة فصل أنزيم اللايسوزايم من زهرة القرنابيط بواسطة محاليل استخلاص مختلفة و بعد إجراء التجارب الأولية ظهر محلول فوسفات الصوديوم الدارئ بتركيز 0.2 مولار و أس هيدروجيني 6.5 كأفضل محلول لكونه أعطى مستخلصا أنزيميا بأعلى فعالية نوعية بلغت 10.9 وحدة / ملغم مقارنة مع المحاليل الأخرى.

تمت تنقية أولية للأنزيم بتركيز المستخلص الخام باستخدام ملح كبريتات الأمونيوم بنسبة تشبع 60 %.

أجريت عملية التنافذ الغشائي للراسب الأنزيمي الخام مقابل محلول فوسفات الصوديوم الدارئ لإزالة الأملاح.

أعقب ذلك التنقية باستخدام كوماتوغرافي التبادل الأيوني على عمود المبادل الموجب Duolite C-464.

أشارت نتائج لتنقية الأيسوزايم الجزئية إلى أن الحصيلة الأنزيمية بلغت 58.2 % بعدد مرات تنقية 7.7 و فعالية نوعية 43.3 وحدة / ملغم.

أظهرت نتائج التوصيف الجزئي لتحديد أفضل أس هيدروجيني لفعالية أنزيم اللايسوزايم بمدى 8-3.5 pH إلا أن الأس الهيدروجيني 6 يمثل أفضل قيم الأس الهيدروجيني المدروسة، في حين تراوح المدى الأمثل لثباته بين قيمتي 6- 5.5 pH أي أنه يكون ثابتا في الأوساط الحامضية.

و عند تحديد درجة الحرارة المثلى لأعلى فعالية لأنزيم اللايسوزايم بدرجات حرارية مختلفة و على مدى تراوح من 30 إلى 80 مº أبدى الأنزيم أقصى فعالية عند درجة حرارة 60 مº.

بيما أشارت نتيجة دراسات الثبات الحراري إلى أن الأنزيم احتفظ تقريبا بكامل فعاليته عند حضنه بدرجات حرارة ما بين (50-65) مº لمدة 15 دقيقة عند الأس الهيدروجيني 6 و بحوالي 92 % من فعاليته الأصلية عند درجة حرارة 70 مº.