Pathological and molecular study of mycotic abortion in ewes

Other Title(s)

دراسة مرضية و جزيئية لمسببات الإجهاض الفطرية في الأغنام

Joint Authors

al-Jabburi, Muhammad Juwayd Ulwan
Abd al-Majid, Ban Abbas
Faris, Bushra Hamzah

Source

Kufa Journal for Veterinary Medical Sciences

Issue

Vol. 4, Issue 1 (30 Jun. 2013), pp.41-56, 16 p.

Publisher

University of Kufa Faculty of Veterinary Medicine

Publication Date

2013-06-30

Country of Publication

Iraq

No. of Pages

16

Main Subjects

Veterinary Medicine

Topics

Abstract AR

تناولت هذه الدراسة عزل الفطريات المصاحبة لحالات الإجهاض في الأغنام في محافظة النجف و كذلك دراسة التغيرات المرضية في مشيمة هذه الحيوانات كما تم استعمال طريقة IHC و PCR في هذه الدراسة لتحديد كمية و مكان إنتاج المحركات الخلوية الالتهابية (TNF alpha) في مشيمات الأغنام المجهضة و مشيمات الأغنام الوالدة طبيعيا.

تم استعمال النسيج المجمد المأخوذ من مشيمة الحيوانات المجهضة و الوالدة طبيعيا لدراسة (TNF alpha) عن طريق معرفة المعلومات الجينية ل (TNF alpha) و ذلك باستعمال تقنية (PCR) عن طريق استعمال بادات خاصة ل (TNF alpha) ذي الوزن الجزيئي (238bp) و حسب تردد القواعد الامينية التالية : GAA TAC CTG GAC TAT GCC GA, CC TCA CTT CCC TAC ATC CCT كذلك تم استعمال النماذج المذكورة آنفا في استخلاص الحامض النووي (DNA) لتقويم (TNF alpha) في مشيمة الحيوانات المذكورة آنفا.

تم عزل 10 أنواع فطرية من 50 مشيمة أغنام مجهضة (Coccidioides spp) بعدد 8 من مجموع 50 و بنسبة (16%) و (Aspergillus fumigates) بعدد 7 من مجموع 50 و بنسبة (14%) و (Aspergillus ochraus, Trichophyton spp and Rhodotella rubra) بعدد 5 من مجموع 50 و بنسبة (10 %) و (Candida krusei) بعدد 4 من مجموع 50 و بنسبة (8 %) و (Aspergillus flavus and Geotrichm) بعدد 3 من مجموع 50 و بنسبة (6 %) و (Cryptococcus uniguttulutus , Saccharomyces.cerevisia Prototheca..zopfi Candida zeylanoides, and Blast.capitatus) بعدد 2 من مجموع 50 و بنسبة (4 %).

و من خلال هذه النتائج تبين أن فطر (Coccidioides spp) هو من أخطر الفطريات المعزولة في هذه الدراسة و تم تسجيله لأول مرة في العراق.

من خلال نتائج (PCR) ل (TNF alpha)، أظهرت هذه الدراسة وجود حزم إضافية ذات وزن جزيئي 600-400-300 فضلا عن الحزمة الاعتيادية ل (TNF alpha) ذي الوزن الجزيئي (238).

و قد لوحظت هذه التغيرات في مشيمة الحيوانات المجهضة مقارنة بالنماذج العائدة إلى الحيوانات الوالدة طبيعيا و من الممكن أن يكون هذا سببه حدوث تغيرات أو تحويرات (polymorphism in TNF alpha).

أما من خلال نتائج (IHC) لبروتين (TNF) فقد تم ملاحظة زيادة ملحوظة في بروتين (TNF) في الخلايا الالتهابية (البلعمية) العائدة إلى مشيمة الحيوانات المجهضة، في حين لا توجد هنالك أي تغيرات ممكن ملاحظتها لهذا البروتين في مشيمة الأغنام الوالدة طبيعيا.

و قد تم ملاحظة وجود علاقة مترابطة بين نتائج (PCR) و (IHC) ففي حالة وجود التغيرات (polymorphism)، تكون هنالك زيادة ملحوظة في البروتين المنتج.

تبين وجود ارتباط بين ضراوة الفطر المسبب للإجهاض و بين التغيرات الخاصة ل (TNF alpha).

أما بالنسبة إلى التغيرات المرضية في مشيمة الأغنام المجهضة فقد شملت وجود التهاب قيحي مشيمي متموت فضلا عن احتقان الأوعية الدموية و ترسب الكالسيوم في أنسجة المشيمة، كذلك وجود انسلاخ لخلايا (syncytotrophoblast) في أنسجة مشيمة الحيوانات المجهضة.

أما التغيرات المرضية في أجنة الحيوانات المجهضة فقد تم ملاحظة التهاب رئوي قيحي، و التهاب كبدي تموتي و التهاب الطحال الليفي التموتي كذلك فمن أهم التغيرات المرضية التي تمت ملاحظتها هي وجود (Spheriole) في المشيمة و أجنة الحيوانات المجهضة المصابة بفطر (Coccidioides spp).

Abstract EN

The aims of the present study is to isolate the fungal species associated with ewe abortion and to examine the histopathological changes in the placenta associated with fungal isolates .In addition to study the genetic information of TNF alpha gene, intensity and score of TNF-alpha protein in aborted and normal placenta by PCR and IHC respectivly.

Frozen placental tissue and paraffin embedded tissue belong to aborted and normal groups were used for assessment of TNF alpha gene by studying the genetic information of TNF-alpha gene in aborted and normal placental sample by PCR .immmunohistochemical study was carried out to determine TNF protein in the placental sample.

The same frozen placenta tissue samples were also used for DNA extraction to detect TNF alpha gene in the two groups.

A fragment of (238 bp) of the TNF alpha gene was amplified by PCR using primers ,the sequence of sense and antisense primer for TNF alpha gene was : the study showed that 10 fungal species were isolated from aborted placenta with high percentage of these isolates was recorded in March ,.The fungal isolates were variable according to region of sample collecting ,high percentage in the AL-Manathera(36 %),followed by Al-Kuzweenia (34 %) and Al-Shabaka(30 %).

The fungal isolates include Coccidioides immitis (16 %).

Asperigllus.fumigitus (14 %), Trichophyton, Rhodetella rubra, and Aspergillus.ochraus, (10 %) for each one .

Candida kruzei, (8 %).

Aspergillus.flavus and Geotrichum, 6 %) for each one .

Prototheca..zopfi, Saccharomyces.cerevisia, Blast.capitatuss, Cryptococcus uniguttultus and Candida zeylanoides,(4 %) for each one.

This study revealed the presence of ~238bp band in addition to the ~300, 400 and 600 bp.

desired fragment in PCR products that related to aborted samples compared to normal one, this may be due to polymorphism within the TNF gene itself.

We found a significant elevated TNF alpha protein in inflammatory cell (macrophage) of aborted sheep placenta (increasing of intensity and score), while no changes could be observed for pro-inflammatory molecules in the control sample (normal delivery) The current study expressed correlation between polymorphisms in TNF- alpha gene ,immunohistochimistry and the fungal isolated species.

The histopathological examination showed acute suppurative placentitis, necrosis of chorion villi, congestion of blood vessels with fibrin deposition in the villus stroma and inter villus space, in addition to calcification in the villus stroma and sloughing and desquamation of cytotrophoblast .numerous yeast and spheriols were detected in the placental tissue by periodic acid Schiff reaction(PAS).

American Psychological Association (APA)

Faris, Bushra Hamzah& al-Jabburi, Muhammad Juwayd Ulwan& Abd al-Majid, Ban Abbas. 2013. Pathological and molecular study of mycotic abortion in ewes. Kufa Journal for Veterinary Medical Sciences،Vol. 4, no. 1, pp.41-56.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-351531

Modern Language Association (MLA)

Faris, Bushra Hamzah…[et al.]. Pathological and molecular study of mycotic abortion in ewes. Kufa Journal for Veterinary Medical Sciences Vol. 4, no. 1 (2013), pp.41-56.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-351531

American Medical Association (AMA)

Faris, Bushra Hamzah& al-Jabburi, Muhammad Juwayd Ulwan& Abd al-Majid, Ban Abbas. Pathological and molecular study of mycotic abortion in ewes. Kufa Journal for Veterinary Medical Sciences. 2013. Vol. 4, no. 1, pp.41-56.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-351531

Data Type

Journal Articles

Language

English

Notes

Includes bibliographical references : p. 54-56

Record ID

BIM-351531