Characterization of alkaline protease from Thermoactinomyces sp.
Author
Source
Issue
Vol. 2005, Issue 19 (30 Sep. 2005), pp.446-456, 11 p.
Publisher
University of Babylon College of Sciences
Publication Date
2005-09-30
Country of Publication
Iraq
No. of Pages
11
Main Subjects
Topics
Abstract AR
عزلت السلالة.Thermoactinomyces sp من عينة السماد الحيواني المخمر و تم تشخيص العزلة بالاعتماد على الصفات المزرعية و المجهرية و الكيموحيوية للبكتريا.
تفرز خلايا البكتريا البروتييز الخارجي في الوسط القاعدي الصلب المحتوي على 1 % كازين و الوسط السائل.
تم تنقية الأنزيم جزئيا 40 مرة من راشح المزرعة بعدة خطوات متسلسلة مثل الترسيب بملح كبريتات الامونيوم (80 % تشبع) ثم كروموتوغرافيا التبادل الأيوني بطريقة العمود باستخدام المبادل DEAE-cellulose و بعد ذلك بالمبادل CM-cellulose.
تم دراسة بعض صفات الأنزيم، إذ وجد أن الأنزيم المنقى جزئيا يمتلك فعالية مثلى في اس هيدروجيني 10 و كان الأنزيم ثابتا في مدى من الاس الهيدروجيني القاعدي من 8 إلى 10 لمدة 10 دقيقة.
تزداد الفعالية الأنزيمية اتجاه الكازين بارتفاع درجات الحرارة و الفعالية العظمى له في 60 م.
و كان الأنزيم ثابتا في درجات حرارية ادنى من 55م و يفقد 75 % من الفعالية بعد حضنه بدرجة حرارة 70م لمدة 30 دقيقة.
تثبيط البروتييز القاعدي بشكل كامل بوساطة PMSF و DFP في حين لم يظهر EDTA أي تثبيط على الفعالية الأنزيمية لذلك يعقد بان الأنزيم من نوع بروتييز السيرين.
Abstract EN
Thermoactinomyces sp.
was isolated from fermented composed sample.
The bacterial isolate was identified according to the cultural, microbiological and biochemical characteristics.
The bacterial cells secreted the extracellular protease in alkaline agar medium that contained 1 % Hammerstein casein and liquid culture.
The enzyme was partially purified 40-fold from culture filtrate by sequential steps including salting out with Ammonium sulfate precipitation (80 % saturation) subsequently ion exchange chromatography with DEAE-cellulose column and then CM-Cellulose column which increased the specific activity of the enzyme up to 1880 U/mg proteins with 72 % recovery.
Characterization study of the partially purified enzyme was revealed that the enzyme had an optimum activity at pH of 10 and the activity was stable in the alkaline pH range from 8 to 12 for 30 min.
Enzyme activity toward casein increased with increasing temperature and the maximal activity at 60° C.
The enzyme was stable at temperature under 55˚C and approximately 75 % of the activity abolished by incubation of the enzyme at 75° C for 30 min.
Alkaline protease activity was completely inhibited by PMSF and DFP ; while EDTA showed no inhibition on protease activity that is suggested that the enzyme is a serine protease.
American Psychological Association (APA)
Umran, Rabab. 2005. Characterization of alkaline protease from Thermoactinomyces sp.. National Journal of Chemistry،Vol. 2005, no. 19, pp.446-456.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-362357
Modern Language Association (MLA)
Umran, Rabab. Characterization of alkaline protease from Thermoactinomyces sp.. National Journal of Chemistry No. 19 (2005), pp.446-456.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-362357
American Medical Association (AMA)
Umran, Rabab. Characterization of alkaline protease from Thermoactinomyces sp.. National Journal of Chemistry. 2005. Vol. 2005, no. 19, pp.446-456.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-362357
Data Type
Journal Articles
Language
English
Notes
Includes bibliographical references : p. 455-456
Record ID
BIM-362357