Comparison between PCR and conventional culture methods for detection of Campylobacter species from broiler fecal samples
Joint Authors
Anani, Muhammad al-Sayyid
Fadil, Hana Momamed
Hasan, Wafa M. M.
Makki, A. A.
Source
Suez Canal Veterinary Medicine Journal
Issue
Vol. 18, Issue 2 (31 Dec. 2013), pp.147-163, 17 p.
Publisher
Suez Canal University Faculty of Veterinary Medicine
Publication Date
2013-12-31
Country of Publication
Egypt
No. of Pages
17
Main Subjects
Topics
Abstract AR
تم إجراء هذا البحث لمقارنة فاعلية ثلاث من طرق التشخيص المعملي المستخدمة لتحديد وجود ميكروب الكامبيلوباكتر.
حيث تم تجميع 50 عينة من زرق الطيور من أقفاص البداري المعدة للذبح.
تم استخدام طريقة الإكثار على (Bolton broth) ثم الزرع على أطباق CCDA , Karmali agar.
و طريقة الفلترة باستخدام مرشح بكتيري (حجم ثقوبه 0.45 ميكرون) على مستنبت الدم الخالي من المضادات الحيوية.
كل العينات تم تحضينها عند 42 م تحت ظروف microaerophilic.
و تم التعرف على المعزولات باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل للتعرف الجزيئي على ميكروب الكامبيلوباكتر عامة بتحديد وجود جين 23 S RNA باستخدام بادئات خاصة).
و لتحديد وجود ميكروبي كامبيلوباكتر جيوجناي و كامبيلوباكتر كولاي باستخدام بادئات خاصة ب (hip O gene) و (gly A gene) كل على حدى على التوالي.
أظهرت النتائج أن استخدام إنزيم البلمرة المتسلسل كان أفضل طرق التشخيص حيث أعطى 14 نتيجة إيجابية بنسبة (28%) يليه طريقة الفلترة (16%).
و تم تحديد وجود ميكروبي كامبيلوباكتر جيوجناي و كامبيلوباكتر كولاي في 1 (2%) و 8 (16%) من العينات.
بينما بلغت نسبة مجموعة الكامبيلوباكتر غير المنتمية لميكروبي كامبيلوباكتر جيوجناي و كامبيلوباكتر كولاي 5 (10%).
بينما لم نتمكن من عزل أي كامبيلوباكتر باستخدام الزرع على أطباق CCDA , Karmali .agar. أظهرت النتائج حساسية عالية لتفاعل البلمرة المتسلسل في تشخيص المرض و بالتالي يمكن استخدامه كوسيلة سريعة لتشخيص وجود الكامبيلوباكتر و تحديد نوعها مما يسهل من سرعة اكتشاف المرض في الطيور و الإنسان و في مجال السلامة و الأمان للأغذية.
و ينصح بعدم استخدام طريقة العزل على مستنبتات البكتيرية المحتوية على المضادات الحيوية لعزل الميكروب من الزرق نظرا لزيادة كمية التلوث على الأطباق التي تعيق اكتشاف الميكروب.
و كذلك ينصح بالحرص على إتباع الطرق الصحية في تربية الدواجن و تقليل تكدس الطيور في الأقفاص عند الذبح و كذلك الحرص على عدم تلوث الذبائح بمحتويات الأمعاء.
Abstract EN
For detection of Campylobacter spp.
in living broilers, a total number of 50 pooled fecal samples were collected from transporting crates from living broilers at slaughtering were investigated.
All samples were examined with conventional culture methods (Selective plating and passive filtration) compared to direct PCR method from enrichment broth.
For selective plating, samples were enriched in Bolton broth followed by cultivation on Karamali agar and Charcoal Cefoperazone Deoxycholate Agar (CCDA) agar plates.
For passive filtration, a fecal suspension in thioglycolate broth was prepared followed by filtration on nonselective blood agar medium overlaid by 0.45 μm cellulose nitrate filter.
Samples were incubated at 42°C under miceroaerophilic conditions.
PCR assay was directed to detect 23 S rRNA specific for Campylobacter spp.
and to detect hip O gene and glyA gene specific for C.
jejuni and C.
coli, respectively.
It was found that PCR method directly from the enrichment broth gave the best results within few hours (14 / 50, 28 %), followed by filtration technique (8 / 50, 16 %) and the selective enrichment method failed to detect any Campylobacter spp.
While C.
jejuni and C.
coli were detected in 1 (2 %) and 8 (16 %) of given samples, 5 samples (10 %) yielded non-jejuni non-coli Campylobacter spp.
American Psychological Association (APA)
Anani, Muhammad al-Sayyid& Fadil, Hana Momamed& Hasan, Wafa M. M.& Makki, A. A.. 2013. Comparison between PCR and conventional culture methods for detection of Campylobacter species from broiler fecal samples. Suez Canal Veterinary Medicine Journal،Vol. 18, no. 2, pp.147-163.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-370947
Modern Language Association (MLA)
Anani, Muhammad al-Sayyid…[et al.]. Comparison between PCR and conventional culture methods for detection of Campylobacter species from broiler fecal samples. Suez Canal Veterinary Medicine Journal Vol. 18, no. 2 (2013), pp.147-163.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-370947
American Medical Association (AMA)
Anani, Muhammad al-Sayyid& Fadil, Hana Momamed& Hasan, Wafa M. M.& Makki, A. A.. Comparison between PCR and conventional culture methods for detection of Campylobacter species from broiler fecal samples. Suez Canal Veterinary Medicine Journal. 2013. Vol. 18, no. 2, pp.147-163.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-370947
Data Type
Journal Articles
Language
English
Notes
Includes bibliographical references : p. 157-162
Record ID
BIM-370947
