طريقة مبسطة لتنقية لكتين جنين الحنطة بكروموتوكرافيا الألفة

Abstract AR

نظرا للاستخدامات المتعددة للكتين النقي فقد هدفت هذه الدراسة إلى استخلاصه من جنين الحنطة، و هو أحد النواتج العرضية لتصنيع الطحين.

و شملت خطوات الاستخلاص إزالة الدهن من جنين الحنطة باستخدام الهبتان تلاه استخلاص اللكتين بمحلول حامض الهيدروكلوريك بتركيز 0.05 مولار بنسبة (10 : 1) (وزن / حجم) مدة ساعة واحدة بدرجة حرارة 25 م.

و اخضع المستخلص الخام لخطوات تنقية عدة تمثلت بتركيزه بالترشيح الفائق لإزالة نسبة كبيرة من المركبات ذات الأوزان الجزيئية التي تقل عن 10000 دالتون.

و أجريت عملية غسل و ترشيح متكررة Diafiltration للأنموذج المركز باستخدام محلول Tris-HCl الدارئ بتركيز 0.01 مولار ذي الأس الهيدروجيني 8.5 و حققت هذه الخطوة تنقية جزئية للكتين بلغت 5.71 مرة و بحصيلة مقدارها 98.34 %.

تلتها خطوة كروماتوكرافيا التبادل الأيوني بأسلوب الوجبة باستخدام المبادل ثنائي اثيل امينو اثيل سيليلوز DEAE-Cellulose و بلغت عدد مرات التنقية لجزء الغسل 7.5 مرة في حين بلغت حصيلة اللكتين 80 %.

و أخيرا جرت خطوة تنقية اللكتين باستخدام كروماتوكرافيا الألفة بعمود الكايتين و الذي حضر مختبريا من الهيكل الخارجي للروبيان و أسفرت عملية التحضير عن الحصول على ما يقارب من 40 غم كايتين أي ما يعادل 20 % كايتين من وزن القشور الجافة و استخدم الكايتين المحضر بوصفه شبكة للفصل و ذراعا في كروماتوكرافيا الألفة لتنقية اللكتين.

و بلغت عدد مرات التنقية بعد هذه الخطوة 20 مرة و بحصيلة مقدارها 19.51 %.

و قد تبين أن اللكتين المنقى يتميز بنقاوة عالية حد التجانس و ذلك بظهوره حزمة واحدة عند ترحيله كهربائيا في هلام متعدد الاكريلامايد بظروف ماسخة بوجود المادة المختزلة 2-ميركابتوايثانول و غيابها.

و بإتباع الخطوات المذكورة في هذه الدراسة بلغت كمية اللكتين المحصل عليها 60 ملغم / 1000 غم من جنين الحنطة.