Comparison of rida®quick verotoxino157 test, verocytotoxicty assay and pcr in detection of shiga toxins in cultures of human stool, animal faeces and meat products

Other Title(s)

مقارنة استخدام بعض الاختبارات الحديثة في الكشف عن الميكروب القولوني المفرز لتوكسين شيجا في الحيوانات و الإنسان و منتجات اللحوم

Joint Authors

Turabis, Rida
Hassanin, Zakariyya
Zaydan, Sharif A.

Source

Assiut Veterinary Medical Journal

Issue

Vol. 60, Issue 142 (30 Sep. 2014), pp.14-22, 9 p.

Publisher

Assiut University Faculty of Veterinary Medicine

Publication Date

2014-09-30

Country of Publication

Egypt

No. of Pages

9

Main Subjects

Biology

Topics

Abstract AR

نظرا للأهمية الصحية للميكروب القولونى المفرز لتوكسين شيجا و دوره في حدوث الاسهال في بعض الحيوانات و الانسان أجريت هذه الدراسة علي عدد 623 عينة شملت روث الاغنام (214 عينة) و براز الانسان (9.2 عينة) بالاضافة إلى200 عينة من منتجات اللحوم المختلفة.

تم فحص العينات معمليا لعزل الميكروب القولوني المفرز لتوكسين شيجا أولا بطريقة العزل علي الوسط المخصص (Media-SMAC) و الذى أسفر عن وجود 77 عينة ايجابية للميكروب القولوني تم تأكيدها باستخدام الطرق البيوكيميائية.

كذلك تم اختبار العينات الايجابية باستخدام cell assay vero) VCA) لتحديد العترات المفرزة لتوكسين شيجا.

بعد ذلك تم تصنيف العينات الايجابية لاختبار VCA سيرولوجيا و كذلك تم تأكيدها باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل المتعدد (PCR Multiplex) لتحديد نوع الجين المسئول عن افراز سموم شيجا.

هذا و قد أسفر فحص العينات عن تواجد 37 عينة ايجابية لاختبارVCA 15 من الاغنام و 7من الانسان و15من المنتجات) تم تأكيدهم جميعا بالاختبارات السيرولوجية و كذلك باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل المتعدد (PCR Multiplex) بنسبة 100 %.

تم مقارنة اختبار الكروماتوجرافي المناعي بالاختبارات السابقة وذلك بفحص 37 عينة ايجابية و أسفر الفحص عن كشف 33 عينة منهم مما يعنيان له حساسية تعادل (%l8.89 ) و هذا يؤكد كفاءة و سرعة الاختبار في تشخيص الميكروب القولونى المفرز لتوكسين شيجا.

كما أسفر استخدام تفاعل البلمرة المتسلسل المتعدد (PCR Multiplex) بواسطة بادئات لجينات شيجا توكسين1 Stxl وشيجا توكسين2 Stx2 وeae عن وجود أوغياب هذه الجينات في العينات المعزولة.

و كانت أكثر المعزولات من الأغنام و الانسان و المنتجات هي Ol57,O26 ,Ol03 , O20 ,Olll و غيرها مما يقوي من دور الأغنام و اللحوم الملوثة في نقل العدوي للانسان.

Abstract EN

Shiga toxins (Stx) are the major virulence factors of STEC, which cause diarrhea, life-threatening haemolytic uraemic syndrome (HUS) and acute renal failure in children.

This work aimed to evaluate the new RIDA®QUICK Verotoxin/O157(RBiopharm, Darmstadt, Germany), which detects Stx & E.

coli serogroup O157 and to determine the extent of faecal contamination of meat products by STEC.

A total 623 samples, including 214 faecal samples collected from sheep, 209 stool samples from human and 200 samples of different meat products were cultured on Trypticase Soya Broth and CT-Sorbitol MacConkey agar, samples were Biochemically identified as Escherichia coli.

Further identifications were performed by serotyping and Vero cells cytotoxicity assay.

PCR for specific VT1/VT2 genes and RIDA®QUICK Verotoxin/O157 were applied on VCA positive samples.

The results of RIDA®QUICK revealed the detection of STEC in 14(93.33%), 6 (85.71%) and 13(86.66%) while PCR test detected 15(100%), 7(100%) and 15(100%) VCA positive samples from sheep, man and meat products, respectively.

Overall RIDA®QUICK Verotoxin / O157 Combi test detected 33(89.18%) from 37 strains of STEC that were positive for VCA and PCR.

The test was sensitive for the Stx1 (9/9 positive), Stx2 (18/22 positive) and Stx1& Stx2 (6/6).

Moreover, The sensitivity of the assay for the E.

coli O157 antigen was tested with 7 strains belonging to sheep (4 strains) and man (3strains), The RIDA Quick assay detected all of them.

Furthermore, Strains belonging to the non-O157 serogroups did not react for the O157 antigen in the RIDA Quick assay indicating a specificity of 100%.

In Conclusion: Fecal contamination of meat products is important route through which STEC pathogens enter the food chain and the new RIDA®QUICK Verotoxin/O157 is a highly sensitive, specific and rapid method to determine the presence of Stx and serogroup O157 in enrichment cultures.

American Psychological Association (APA)

Zaydan, Sharif A.& Turabis, Rida& Hassanin, Zakariyya. 2014. Comparison of rida®quick verotoxino157 test, verocytotoxicty assay and pcr in detection of shiga toxins in cultures of human stool, animal faeces and meat products. Assiut Veterinary Medical Journal،Vol. 60, no. 142, pp.14-22.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-591288

Modern Language Association (MLA)

Zaydan, Sharif A.…[et al.]. Comparison of rida®quick verotoxino157 test, verocytotoxicty assay and pcr in detection of shiga toxins in cultures of human stool, animal faeces and meat products. Assiut Veterinary Medical Journal Vol. 60, no. 142 (Sep. 2014), pp.14-22.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-591288

American Medical Association (AMA)

Zaydan, Sharif A.& Turabis, Rida& Hassanin, Zakariyya. Comparison of rida®quick verotoxino157 test, verocytotoxicty assay and pcr in detection of shiga toxins in cultures of human stool, animal faeces and meat products. Assiut Veterinary Medical Journal. 2014. Vol. 60, no. 142, pp.14-22.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-591288

Data Type

Journal Articles

Language

English

Notes

Includes bibliographical references : p. 21-22

Record ID

BIM-591288