Phenotypic characterization and molecular identification of some lactic acid producing bacteria in raw milk of different animal species

Other Title(s)

الخصائص الظاهرية و التصنيف الجزيئي لبعض البكتيريا المنتجة لحمض اللاكتيك في اللبن الخام لأنواع الحيوانات المختلفة

Joint Authors

Usfur, Hana Abd al-Munim Abd al-Fattah
Jamal al-Din, Inas Muhammad
Darwish, Samah Fikri

Source

Assiut Veterinary Medical Journal

Issue

Vol. 62, Issue 149 (30 Apr. 2016), pp.47-59, 13 p.

Publisher

Assiut University Faculty of Veterinary Medicine

Publication Date

2016-04-30

Country of Publication

Egypt

No. of Pages

13

Main Subjects

Biology

Topics

Abstract AR

تم تجميع عدد ٢٢٨ عينة لبن سليم ظاهريا من الأبقار (١٠٠ عينة من حالات فردية و ٨٦ عينة من خزانات تجميع اللبن) و من الماعز (٣٠ عينة) و من لبن النوق (1٢ أعينة) و ذلك لعزل بعض أنواع البكتيريا المنتجة لحمض اللاكتيك و خصوصا الشكل المكور منها.

أظهرت نتائج الفحص الأولى و المعتمد على الخصائص المورفولوجية تباين معزولات البكتيريا المنتجة لحمض اللاكتيك إلى ٤ مجموعات هي المكورات المعوية (الإنتيروكوكاى)، اللوكونوستوكس، البيديوكوكاى و المكورات السبحية بنسبة إجمالية قدرها 61 %.

و قد سجلت أعلى نسبة عزل لأنواع المكورات المعوية (الإنتيروكوكاى) في الحيوانات المختلفة و خاصة في لبن النوق حيث وصلت نسبة عزلها إلى 41.7 %.

أيضا تم دراسة التأثير المضاد لعدد ٧٥ معزولة ممثلة لكل أنواع البكتيريا المنتجة لحمض اللاكتيك على بعض أنواع البكتيريا المسببة لالتهاب الضرع في الماشية و منها المكور العنقودي الذهبي و المكور السبحي يوبرس و الإكولاى و اليرسينيا إنتيروكولوتيكا و الذي تم عزلهم من حالات التهاب الضرع.

و قد سجلت النتائج أعلى تأثير مثبط لثمانية عشر معزولة من الإنتيروكوكاى و قد تراوح قطر منطقة التثبيط بين 10-٢٥ ملم على أنواع البكتيريا المختلفة المسببة لالتهاب الضرع المذكورة سابقا.

في هذه الدراسة تم استخدام تقنية الفصل الكهربي لبروتين هذه البكتيريا كوسيلة مساعده للتشخيص الكيميائي و ذلك للتعرف على العترات المختلفة للبكتيريا المنتجة لحمض اللاكتيك و قد أتت نتائجه مؤكدة لنتائج التشخيص الكيميائي حيث وصلت نسبة التشابه بينهما إلى 90.8 % لـ اللوكونوستوك ميزنترويدس و 92.5 % لـ البيديوكوكس أسيديلاكتيسى و 99.84 % لـ الإنتيروكوكس هيرى و 99.89 % للمكور السبحى ثيرموفيلاس.

تم انتقاء بعض العترات الممثلة لبكتيريا الإنتيروكوكاى و التي سجلت أعلى نسبة عزل بين الأنواع المختلفة للبكتيريا المنتجة لحمض اللاكتيك و كان لها أعلى تأثير مثبط للبكتيريا المسببة لالتهاب الضرع تحت الاختبار و ذلك لتأكيد تصنيفها عن طريق تحديد تتابع التسلسل النيوكليتيدى لجين الـ 16SrRNA gene و قد أظهرت النتائج تصنيف معزولتان الإنتيروكوكس فيكيم و الإنتيروكوكس هيرى و تم إدخال التتابع النيوكلتيدى لهما في بنك الجينات تحت الأرقام KU847974 و KU847975 لكل منهم على التوالي و قد وصلت نسبة التماثل في التسلسل إلى 99 % لكل منهما مع مثيلاتهم في بنك الجينات.

خلصت هذه الدراسة إلى أن اللبن الحيواني الخام قد يكون مصدرا محتملا لعزل أنواع مختلفة من بروبيوتيك بكتيريا المنتجة لحمض اللاكتيك و التي تتميز بخصائصها المضادة للبكتيريا المسببة لالتهاب الضرع و التي يمكن تقديمها كبديل للمضادات الحيوية للتغلب على مقاومة هذه البكتيريا للمضادات الحيوية و كذلك التغلب على مشكلة وجود بقايا المضادات الحيوية في اللبن.

Abstract EN

A total number of 228 apparently healthy milk samples were collected from individual and bulk tank milk of cows (100 and 86 samples, respectively), goats (30) and she camel (12) for isolation of some lactic acid bacteria (LAB) especially that have coccal form.

The preliminary screening LAB community at the genus level depending on the basis of morphological characteristics showed that, the isolates were differentiated into 4 groups; Enterococci, Leuconostocs, Pediococci and Streptococci with a total percentage of 61 %.

The highest % of LAB was recorded for Enterococcus species in the different animal species especially in camel milk (41.7 %).

Antibacterial activity of selected 75 LAB strains against S.

aureus, S.

uberis, E.

coli and Yersinia enterocolotica as bovine mastitis pathogens were detected.

53 out of 75 of the selected strains showed antibacterial effect against the tested pathogens.

Eighteen Enterococcus isolates have inhibitory effects on all of the tested bacteria with inhibition zone diameter ranged between 10-25 mm.

Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) was used as an aid step for identification of LAB strains.

Thus the SDS-PAGE results confirmed the biochemical identification of the isolated cultures for Leuconostoc mesenteroides with a percentage of similarity (90.8 %), for Pediococcus acidilactici (92.5 %), for Enterococcus hirae (99.84 %) and for Streptococcus thermophilus (99.89 %).

Representative strains of genus Enterococci that had higher antibacterial activity against mastitis pathogens were subjected to sequence-based identification.

The obtained sequences of these isolates were submitted to the Gen Bank database with accession numbers KU847974 and KU847975 for E.

faecium and E.

hirae, respectively and showed 99% 16S rRNA sequence homology.

It was concluded that raw animal milk may be a potential source for the isolation of probiotic LAB with antibacterial properties against mastitis pathogens that may be presented as an interesting alternative to antibiotic drugs to overcome the antibiotic resistance of mastitis pathogens as well as antibiotic residues in milk.

American Psychological Association (APA)

Usfur, Hana Abd al-Munim Abd al-Fattah& Jamal al-Din, Inas Muhammad& Darwish, Samah Fikri. 2016. Phenotypic characterization and molecular identification of some lactic acid producing bacteria in raw milk of different animal species. Assiut Veterinary Medical Journal،Vol. 62, no. 149, pp.47-59.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-683434

Modern Language Association (MLA)

Usfur, Hana Abd al-Munim Abd al-Fattah…[et al.]. Phenotypic characterization and molecular identification of some lactic acid producing bacteria in raw milk of different animal species. Assiut Veterinary Medical Journal Vol. 62, no. 149 (Apr. 2016), pp.47-59.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-683434

American Medical Association (AMA)

Usfur, Hana Abd al-Munim Abd al-Fattah& Jamal al-Din, Inas Muhammad& Darwish, Samah Fikri. Phenotypic characterization and molecular identification of some lactic acid producing bacteria in raw milk of different animal species. Assiut Veterinary Medical Journal. 2016. Vol. 62, no. 149, pp.47-59.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-683434

Data Type

Journal Articles

Language

English

Notes

Includes bibliographical references : p. 56-58

Record ID

BIM-683434