Evaluation of conventional PCR assay in comparison to real-time PCR assay for detection of bovine herpesvirus-1 in bovine semen and seminal plasma

الملخص AR

الهدف من هذه الدراسة هو تقييم حساسية اختبار تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي مقارنة باختبار تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي في الكشف عن فيروس الهربس البقري -1 في كل من السائل المنوي و بلازما السائل المنوي للأبقار.

تم عمل تخفيفات من عشرة أضعاف أضعاف (ten folder dilutions) من الفيروس في مل من ميديا الـ MEM و السائل المنوي البقري السلبي للفيروس.

تبدأ التخفيفات من تركيز 10 7 - 10 -4 (10-4 – 107 TCID50) و ذلك للكشف عن الحد الأدنى من الفيروس و اللازم لكل من الاختبارين، تم استخلاص الحمض النووي الديوكس ريبوزي من كل من ميديا الـ MEM و السائل المنوي المعديان بالفيروس كما تم أيضا استخلاص الحمض النووي الديوكس ريبوزي من بلازما السائل المنوي المأخوذة من السائل المنوي المعدي بالفيروس معمليا.

و قد وجد أن حساسية اختبار تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي في الكشف عن الحمض النووي المستخلص من تخفيفات الفيروس في كل من ميديا الـ MEM و السائل المنوي هما 10-1 TCID50 / ml و 102 TCID50 / ml على الترتيب.

بينما الحساسية تصل إلى 1 TCID50 / ml عند استخدام الحمض النووي من بلازما السائل المنوي المعدي بالفيروس.

أما بالنسبة لاختبار تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي فقد كانت الحساسية هي1 TCID50 / ml في كل من ميديا الـ MEM و السائل المنوي المعدي بالفيروس بينما كانت الحساسية 10 TCID50 / ml عند استخدام بلازما السائل المنوي.

خلصت هذه الدراسة إلى أن اختبار تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدي الذي تم تقييمه في هذه الدراسة يعطي نتائج مرضية و مقبولة للكشف عم فيروس الهربس البقري -1 في السائل المنوي للأبقار مقارنة باختبار تفاعل البلمرة المتسلسل الكمي المقيم في نفس الدراسة و اختبارات تفاعل البلمرة المتسلسل التقليدية المسجلة في البحوث الأخرى.

و قد وجد أن استخدام بلازما السائل المنوي بدلا من السائل المنوي الكامل يمكن أن يكون بديلا أفضل يزيد من حساسية الاختبار.