Expression of recombinant escherichia coli l-asparaginase II, purification and characterization
العناوين الأخرى
انتاج إنزيم الأسبراجينيز 2-النعبر عنه في بكتيريا القولون، تنقية و دراسة خواصه
المؤلفون المشاركون
Maharem, Tahany Mahmud
Sabri, Gilane Muhammad
Muhammad, Muhammad Raja
Muhammad, Manal Asim Imam
المصدر
The Egyptian Journal of Biochemistry and Molecular Biology
العدد
المجلد 29، العدد 2 (31 ديسمبر/كانون الأول 2011)، ص ص. 237-256، 20ص.
الناشر
الجمعية المصرية للكيمياء الحيوية و البيولوجيا الجزيئية
تاريخ النشر
2011-12-31
دولة النشر
مصر
عدد الصفحات
20
التخصصات الرئيسية
الملخص AR
يلعب الأسبراجينيز دورا هاما في الحفاظ على الاتزان النيتروجيني و مستوى الأحماض الأمينية داخل الخلايا الطبيعية حيث إنه يحول الأسبراجين إلى حمض أسبارتك و نشادر كما أنه يعتبر دواء فعالا في علاج سرطان الدم حيث أنه يؤدي إلى اختفاء أسبراجين الدم فتحرم خلايا السرطان من هذا الحامض الأميني الأساسي و التي تعد عاجزة بدورها على تكوينه مما يترتب على ذلك هلاكها حيث تصبح غير قادرة على بناء البروتينات اللازمة لخلاياها.
شملت الدراسة تحضير إنزيم الأسبراجينيز المهجن من بكتريا القولون باستخدام تفاعل البلمرة المتسلسل، تفاعلات القطع المزدوج و اللصق لجين الأسبراجينيز و الناقل البلازميدي المعبر و إنتاج بروتين أسبراجينيز -2 داخل بكتريا القولون ثم فصله و تنقيته باستخدام عمود جلوتاثيون سيفاروز.
و قد تم دراسة بعض الخصائص الكيميائية الحيوية لإنزيم الأسبراجينيز مثل الوزن الجزيئي 152 كيلو دالتون، نقطة التعادل الكهرب 5,1، ثابت ميكائيل 12,5 ميكرومول للإنزيم، ثابت التحفيز 1×210 ثانية-1، و ثابت الاختصاص 0,8 × 610، مول-1 ثانية-1.
الملخص EN
-L-Asparaginase (ASNase) is an anti-cancer ("antineoplastic" or "cytotoxic") chemotherapy drug that is used for the treatment of acute lymphoblastic leukemia (ALL).
An efficient and economical scheme was developed for over expression and rapid purification of the Escherichia coli enzyme.
The gene encoding for the Escherichia coli L-asparaginase were PCR-amplified and cloned in pGEX-4Tl expression vector.
The recombinant L-asparaginase was purified to homogeneity by affinity chromatography on glutathione Sepharose column.
The recombinant enzyme had an apparent MW of 152 kDa and a Km value of 12.5 |iM for the main physiological substrate L-asparagine.
The p / value was 5.6 while the turnover number (catalytic constant) was 1 x 102 s"1 and the Kca / Km value (specificity constant) was 0.8 x 107 M'V1.
نمط استشهاد جمعية علماء النفس الأمريكية (APA)
Maharem, Tahany Mahmud& Sabri, Gilane Muhammad& Muhammad, Muhammad Raja& Muhammad, Manal Asim Imam. 2011. Expression of recombinant escherichia coli l-asparaginase II, purification and characterization. The Egyptian Journal of Biochemistry and Molecular Biology،Vol. 29, no. 2, pp.237-256.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-279298
نمط استشهاد الجمعية الأمريكية للغات الحديثة (MLA)
Maharem, Tahany Mahmud…[et al.]. Expression of recombinant escherichia coli l-asparaginase II, purification and characterization. The Egyptian Journal of Biochemistry and Molecular Biology Vol. 29, no. 2 (Dec. 2011), pp.237-256.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-279298
نمط استشهاد الجمعية الطبية الأمريكية (AMA)
Maharem, Tahany Mahmud& Sabri, Gilane Muhammad& Muhammad, Muhammad Raja& Muhammad, Manal Asim Imam. Expression of recombinant escherichia coli l-asparaginase II, purification and characterization. The Egyptian Journal of Biochemistry and Molecular Biology. 2011. Vol. 29, no. 2, pp.237-256.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-279298
نوع البيانات
مقالات
لغة النص
الإنجليزية
الملاحظات
Includes bibliographical references : p. 252-256
رقم السجل
BIM-279298
قاعدة معامل التأثير والاستشهادات المرجعية العربي "ارسيف Arcif"
أضخم قاعدة بيانات عربية للاستشهادات المرجعية للمجلات العلمية المحكمة الصادرة في العالم العربي
تقوم هذه الخدمة بالتحقق من التشابه أو الانتحال في الأبحاث والمقالات العلمية والأطروحات الجامعية والكتب والأبحاث باللغة العربية، وتحديد درجة التشابه أو أصالة الأعمال البحثية وحماية ملكيتها الفكرية. تعرف اكثر
