Purification and characterization of vigna unguiculata cultiver asparaginase

الملخص AR

تم في هذا البحث تعين نشاط إنزيم الاسبراجنيز في الأصناف المختلفة لنبات اللوبيا في البذور الجافة و المستنبتة.

و قد ركزت هذه الدراسة على انتخاب أفضل هذه الأصناف من نبات اللوبيا لاستخلاص إنزيم اسبراجنيز لاستخدامه للأغراض الطبية.

و قد أثبتت النتائج أن البذور المستنبتة لنبات اللوبيا من صنف فودر يعتبر مصدر جيد كمادة بادئة لإنتاج إنزيم اسبراجنيز.

تم فصل هذا الإنزيم من البذور المستنبتة لنبات اللوبيا من صنف فودر باستخدام الفصل الكروماتوجرافي.

و قد أظهر الفصل الكروماتوجرافي على عمود ثنائي ايثيل امينو اثيل سيفاروز ثلاثة أشكال من إنزيم الاسبراجنيز (asp1، asp11، asp111) وجد أن asp11 أعلاهم نشاطا لذلك تم الترشيح له بواسطة الجيل باستخدام مادة السيفاكريل لتنقيته إلى درجة التجانس و تحديد الوزن الجزئي.

و قد قدر الوزن الجزئي لإنزيم asp11 الترشيح بواسطة الجيل ب 70 كيلو دالتون و باستخدام طريقة الفصل الكهربي على جل البولي اكريلميد-كبريتات دودسيل الصوديوم ب 35 كيلو دالتون..

و قد وجد أن asp11 له ثابت مايكل هو 1،25 ميلي مولار اسبرا جين و اس هيدروجيني الأمثل ودرجة الحرارة المثلى كانت 40،8 درجة سيليوس على الترتيب.

و قد وجد أن asp11 له قابلية أكثر لدى اسبرا جين عن الجلوتامين اللذان لهما خاصية الدوران الضوئي الأيسر و لا يعمل على تكسير اسبرا جين له دوران الضوئي الأيمن.

تم دراسة فاعلية تأثير أيونات الفلزات على هذه الإنزيم حيث وجد أن النيكل والكوبلت له تأثير منشط بينما الزنك، الباريوم، المنجنيز، الزئبق مثبطات ل asp11 و أن الزئبق أكثر تثبيطا للإنزيم حيث يثبط حوالي 80 % من نشاط الإنزيم.