Purification and characterization of vigna unguiculata cultiver asparaginase
Other Title(s)
التقنية و خصائص إنزيم الاسبراجينز المستخلصة من صنف نبات اللوبيا
Author
Source
The Egyptian Journal of Biochemistry and Molecular Biology
Issue
Vol. 27, Issue 1 (30 Jun. 2009), pp.145-162, 18 p.
Publisher
Egyptian Society of Biochemistry and Molecular Biology
Publication Date
2009-06-30
Country of Publication
Egypt
No. of Pages
18
Main Subjects
Abstract AR
تم في هذا البحث تعين نشاط إنزيم الاسبراجنيز في الأصناف المختلفة لنبات اللوبيا في البذور الجافة و المستنبتة.
و قد ركزت هذه الدراسة على انتخاب أفضل هذه الأصناف من نبات اللوبيا لاستخلاص إنزيم اسبراجنيز لاستخدامه للأغراض الطبية.
و قد أثبتت النتائج أن البذور المستنبتة لنبات اللوبيا من صنف فودر يعتبر مصدر جيد كمادة بادئة لإنتاج إنزيم اسبراجنيز.
تم فصل هذا الإنزيم من البذور المستنبتة لنبات اللوبيا من صنف فودر باستخدام الفصل الكروماتوجرافي.
و قد أظهر الفصل الكروماتوجرافي على عمود ثنائي ايثيل امينو اثيل سيفاروز ثلاثة أشكال من إنزيم الاسبراجنيز (asp1، asp11، asp111) وجد أن asp11 أعلاهم نشاطا لذلك تم الترشيح له بواسطة الجيل باستخدام مادة السيفاكريل لتنقيته إلى درجة التجانس و تحديد الوزن الجزئي.
و قد قدر الوزن الجزئي لإنزيم asp11 الترشيح بواسطة الجيل ب 70 كيلو دالتون و باستخدام طريقة الفصل الكهربي على جل البولي اكريلميد-كبريتات دودسيل الصوديوم ب 35 كيلو دالتون..
و قد وجد أن asp11 له ثابت مايكل هو 1،25 ميلي مولار اسبرا جين و اس هيدروجيني الأمثل ودرجة الحرارة المثلى كانت 40،8 درجة سيليوس على الترتيب.
و قد وجد أن asp11 له قابلية أكثر لدى اسبرا جين عن الجلوتامين اللذان لهما خاصية الدوران الضوئي الأيسر و لا يعمل على تكسير اسبرا جين له دوران الضوئي الأيمن.
تم دراسة فاعلية تأثير أيونات الفلزات على هذه الإنزيم حيث وجد أن النيكل والكوبلت له تأثير منشط بينما الزنك، الباريوم، المنجنيز، الزئبق مثبطات ل asp11 و أن الزئبق أكثر تثبيطا للإنزيم حيث يثبط حوالي 80 % من نشاط الإنزيم.
Abstract EN
Asparagine (EC 3.5.1.1) activity was determined in non-germinating seeds and germinating seeds of five Egyptian cowpea (Vigna unguiculata) cultivars (Kareem 7, Dokki 331, Kafer El-Sheikh 1, Kaha 1 and Fodder).
The specific activities of germinating seeds asparagine in different cultivars were higher than the specific activities of non-germinated seeds of these cultivars.
Asparagine was purified from Fodder cultivar germinating seeds (the highest specific activity) and resolved into three peaks with asparagine activities by DEAE sepharose, designated by asp I, asp II and asp III.
The molecular weight of asp II was 70 kDa for native enzyme using gel filtration.
By using SDS-PAGE electrophoresis, asp II had molecular weight about 35 kDa suggesting that a diametric structure for asp II.
AspII had a Km value 1.25 mM for asparagine and a Ph optimum at 8.0.
Asp II had temperature optimum and heat stability at 40 ˚C.
The fodder cultivar asp II activity was specific for Asparagine and did not hydrolyze D-asparagine.
It is not specific for L-glutamine.
Ni2+ and Co2+ had activator effects on asp II but other metals ions had inhibitory effect.
American Psychological Association (APA)
Ali, Ihab Mustafa Muhammad. 2009. Purification and characterization of vigna unguiculata cultiver asparaginase. The Egyptian Journal of Biochemistry and Molecular Biology،Vol. 27, no. 1, pp.145-162.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-28257
Modern Language Association (MLA)
Ali, Ihab Mustafa Muhammad. Purification and characterization of vigna unguiculata cultiver asparaginase. The Egyptian Journal of Biochemistry and Molecular Biology Vol. 27, no. 1 (Jun. 2009), pp.145-162.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-28257
American Medical Association (AMA)
Ali, Ihab Mustafa Muhammad. Purification and characterization of vigna unguiculata cultiver asparaginase. The Egyptian Journal of Biochemistry and Molecular Biology. 2009. Vol. 27, no. 1, pp.145-162.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-28257
Data Type
Journal Articles
Language
English
Notes
Includes bibliographical references : p. 157-161
Record ID
BIM-28257
