استخلاص و تنقية أنزيم الببسين من معدة بعض الحيوانات و إمكانية ربطه و استعماله في الأنظمة الغذائية

العناوين الأخرى

Extraction, purification of pepsin enzyme from some animal stomach and ability immobilizing it and using it in food systems

مقدم أطروحة جامعية

اليونس، زينة كاظم عيسى

مشرف أطروحة جامعية

الطائي، منير عبود جاسم

أعضاء اللجنة

الساهي، علي أحمد
الموسوي، البشر حميد جابر
سندس حميد أحمد
علي حسين عبد الكريم
الربيعي، أميرة محمد صالح

الجامعة

جامعة البصرة

الكلية

كلية الزراعة

القسم الأكاديمي

قسم علوم الأغذية و التقانات الإحيائية

دولة الجامعة

العراق

الدرجة العلمية

دكتوراه

تاريخ الدرجة العلمية

2011

الملخص العربي

هدفت الدراسة الحالية الى استخلاص أنزيم الببسين EC : 3.4.23.1 من بعض المصادر الحيوانية وتنقيته ودراسة بعض صفاته و ربطه و استعماله في التطبيقات العملية في مجال الصناعات الغذائية، استخلص الأنزيم من معدة ثلاثة أنواع من الحيوانات (الأغنام، الدجاج، سمك النويبي) باستعمال خمسة محاليل استخلاص تضمنت الماء المقطر، محلول كلوريد الصوديوم بتركيز 10 %، محلول كلوريد الصوديوم بتركيز 6 % الحاوي على 2 % حامض بوريك، محلول فوسفات الصوديوم الدارىء بتركيز 0.1 مولاري و رقم هيدروجيني 7.3 و محلول Tris-acetic acid بتركيز 0.4 مولاري برقم هيدروجيني 7.6 لغرض تحديد أفضل مصدر للأنزيم و أفضل محلول استخلاص و قد وجد إن معدة الأغنام كانت أفضل مصدر للحصول على الأنزيم مقارنة بالمصادر الأخرى و إن محلول كلوريد الصوديوم 6 % الحاوي على 2 % حامض البوريك هو أفضل محلول استخلاص حيث أعطى أعلى فعالية نوعية للأنزيم و التـي بلغـت 14.3 وحدة / ملغم.

بعد ذلك ركز المحتوى البروتيني للمستخلصات الأنزيمية الخام باستعمال كبريتات الأمونيوم بنسـبة إشـباع تراوحت بيـن 30-70 %، 20-90 %، 20-60 % لببسـين الأغنام و الدجاج و سمك النويبي على التوالي، ثم أجريت عملية الديلزة باستعمال الماء المقطر، و قد أعطى ببسين الدجاج المنقى جزئيا أعلى فعاليـة أنزيميـة مقارنة ببسـين الأغنام و سمك النويبي.

أكملت خطوات تنقية ببسـين الأغنام باستعمال عمود كروماتوغرافيا التبادل الايوني DEAE- Sephadex A-50 ثم الترشيح الهلامي على عمود Sephade G-100 و بلغت عدد مرات التنقية 27.64 مرة و بحصيلة 18.4 %.

بينت نتائج الكشـف عن نقاوة ببسين الأغنام عن وجود حزمة بروتينية واحدة للأنزيم عند الترحيل الكهربائي في هلام متعدد الأكريل أمايد تحت ظروف غير ماسخة بغياب مادة SDS و كان الـوزن الجزيئي لببسـين الاغنام 33,700 دالتون عنـد تقـديـره بطـريقـة الترحيـل الكهربائي في هلام الأكريل أمايد المتعدد بوجـود مـادة SDS .

أظهرت دراسة ربط ببسـين الدجاج المنقى جزئيا باربعة انواع من المواد الرابطة تضمنت السليكاجل، راتنج SRF، الجينات الكالسيوم و الأكار أن أفضل مادة ربط هي الأكار حيث أعطيت أعلى كفاءة ربط و التي بلغت 67 %.

كان أفضل تركيز لربط ببسـين الدجاج المنقى جزئيا.

بالأكار هو 3 % اذ أعطى أعلى فعالية أنزيمية و التي بلغت 75 %، و ربط ببسين الأغنام النقي بالاكار بتركيز 3%.

بلغت الفعالية المتبقية لببسـين الاغنام النقي و لببسين الدجاج المنقى جزئيـا المرتبط بالاكار 25% ، 21% على التوالي بعـد استعماله 7 مرات، و بلغت الفعالية المتبقية لببسين الأغنام النقي و لببسين الدجاج المنقى جزئيا المرتبـط بالاكار22 %، 27.6 % على التوالي عند خزنها لفتـرة 60 يوم على درجة حرارة 4 م.

وجد أن الرقم الهيدروجيني الأمثل للفعالية التحللية لببسين الأغنام النقي الحر و المرتبط و لببسين الدجاج المنقى جزئيا الحر و المرتبط هو 2، بينما أعطى الرقـم الهيدروجيني 5.8 أعلى فعالية تخثرية لببسين الأغنام النقي الحر و المرتبط و لببسين الدجاج المنقى جزئيا الحر و المرتبط و إن الفعالية التخثرية تقل مع ارتفاع الرقم الهيدروجيني من 5.8 إلى 7 و وجد أن الرقم الهيدروجيني الأمثل لثبات ببسين الأغنام النقي الحر و المرتبط و لببسين الدجاج المنقى جزئيا الحر و المرتبط كان 2 و 2-3 على التوالي و إن كلا الأنزيمين الحر و المرتبط منهما فقدا فعاليتهما عند الأرقام الهيدروجينية القاعدية 8 و 9.

كانت درجة الحرارة المثلى للفعالية التحللية لببسين الأغنام النقي الحر 35 م و المرتبط 45 م و لببسين الدجاج المنقى جزئيا الحـر 45 م و المرتبـط 55 م، بيـنما كانـت درجة الحـرارة المثلى للفعالية التخثريـة لببسين الأغنـام النقي الحـر و المرتبـط و للبسين الدجاج المنقى جزئيا الحر و المرتبط هي 35 م و وجد أن درجة الحرارة المثلى لثبات ببسين الأغنام النقي الحر و المرتبط كانت تتراوح بين 15-35 م و لببسين الدجاج المنقى جزئيا كانت تتراوح بين 15-45 م و إن ببسين الأغنام النقي الحر و المرتبط فقد فعاليته بالكامل عند 75 م و85 م على التوالي بينما فقد ببسين الدجاج المنقى جزئيا الحر و المرتبط فعاليته بالكامل عند 85 م.

بلغت طاقة التنشيط لفعالية ببسين الأغنام النقي الحر والمرتبط 8.13 كيلو سعرة / مول، 10.79 كيلو سـعرة / مول على التوالي.

اسـتعمل ببسـين الدجاج المنقى جزئيا المرتبط بالأكار في صناعة الجبن الطري و أظهرت النتائج أن تركيب الجبن المنتج و نتائج التقويم الحسي مقاربة للجبن المنتـج باستعمال منفحة العجول، و هذا دليل على كفاءة الأنزيم في صناعة الجبن الطري و إمكانية إحلاله محل منفحة العجول و إمكانية اسـتخدامه لأكثر من مرة في هذه الصناعة.

كما اسـتعمل ببسـين الدجاج المنقى جزئيا المرتبط بالأكار في تحضير متحلل بروتيني من سـمك الطعطعو و وجد أن التحـلل البروتيني بلغ اقصاه في فترة 180 دقيقة و إن تحـلل ببسـين الدجاج المرتبط كان مقارب لتحـلل ببسين الدجاج الحر حيث بلغ 2.6 ، 2.8 مل على التوالي.

التخصصات الرئيسية

التغذية والحميات

الموضوعات

• الإنتاج
• الأنزيمات

عدد الصفحات

131

قائمة المحتويات

• APA
• MLA
• AMA

لغة النص

العربية

نوع البيانات

رسائل جامعية

رقم السجل

BIM-316820