Study the effect of locally isolated lactobacillus acidophilus and its components as anticancer in vivo

الملخص AR

كان الهدف من الدراسة هو استبيان دور العصيات اللبنية كأحياء علاجية في مجال التعامل مع القولون في الجرذان المختبرية و قد شملت الدراسة عزل و تشخيص 29 عزلة لبكتريا العصيات اللبنية (Lactobacilli) من 11 عينة لغائط الأطفال الرضع حديثي الولادة، فضلا عن عزل و تشخيص عزلة واحدة لبكتريا العصيات اللبنية من اللبن القياسي (كانون)، التي استخدمت لغرض المقارنة في اختبار تحمل الحموضة و أملاح الصفراء.

و قد استخدم نظام API 50 CH لتشخيص العزلات.

أظهرت غربلة العزلات على أساس قدرتها على مقاومة الحموضة قابلية ست عزلات على أبداء مقاومة عالية للحموضة إذ تراوحت قيم أعدادها الحية ما بين (510 x 6.3 – 510 x 1.73 وحدة تكوين مستعمرات / مللتر) مقارنة بقيم الأعداد الحية لبقية العزلات بعد 90 دقيقة من حضنها في مرق MRS برقم هيدروجيني 3.5 التي انخفضت قيم أعدادها الحية بشكل معنوي، أما في ما يخص العزلة المعزولة من اللبن القياسي لم تبد مقاومة عالية للحموضة إذ انخفضت أعدادها الحية بمدى يقارب دورة لوغاريتمية واحدة أو أكثر و التي تعد مهمة إحصائيا، و بهذا لم تبد مقاومة عالية للحموضة.

انتقيت العزلات التي أبدت مقاومة عالية للحموضة لاختبار مقاومتها لأملاح الصفراء، و قد أبدت بكتريا Lactobacillus acidophilus (أحدى العزلات المشخصة) مقاومة عالية لأملاح الصفراء، إذ كانت العزلة الأكفأ من بين العزلات المنتقاة في مقاومتها لأملاح الصفراء، أما بالنسبة لبكتريا Lb.

delbrueckii ssp bulgaricus و التي استحدث لغرض المقارنة مع بقية العزلات لم تبد مقاومة لأملاح الصفراء، إذ انخفضت قيم أعدادها الحية انخفاض شديد (أي أكثر من دورة لوغاريتمية واحدة).

تم استحثاث سرطان القولون في الجرذان المختبرية باستخدام مادة AOM) Azoxymethane) بتركيز 15 ملغم / كغم (وزن الحيوان) التي تؤدي إلى حث سرطان القولون، و ذلك بإضافة مجموعة المثيل إلى ذرة الأوكسجين السادسة في الكوانين (O6 -methyl guanine) و قد استخدمت انزيمات القطع الحساسة و غير الحساسة لمجاميع المثيل في الكشف عن حالة المثيلة، فالانزيم HpaII لا يقطع DNA الحاوي على المثيل لذلك يظهر الأخير بشكل حزمة متماسكة، في حين أن الانزيم MspI يقطع جزيئات DNA بغض النظر عن حالة المثيلة مما يؤدي إلى انتثار DNA في هلام الترحيل الكهربائي (يظهر بشكل مسحة متواصلة).

و قد أجريت دراسة التأثير الوقائي و العلاجي لخلايا و مكونات بكتريا Lb.

acidophilus في الأنظمة الحية in vivo قبل الحقن بالمادة المسرطنة (Pretreatment) و بعد الحقن (Post treatment) على المستوى الجزيئي و قد ظهرت نماذج DNA المستخلصة من قولون الجرذان المختبرية المعاملة بخلايا و مكونات بكتريا Lb.

acidophilus بشكل مسحه صغيرة ضمن هلام الترحيل مع إنزيم التقيد HpaII و هذا بدوره يعكس قابلية خلايا و مكونات بكتريا Lb.

acidophilus في التأثير و التعديل في مثيلة DNA.

مقارنة بنماذج DNA الخاصة بمجموعة حيوانات السيطرة الموجبة و التي ظهرت بشكل حزمة ضمن هلام الترحيل عند حضنها مع الإنزيم نفسه، مما يدل على وجود مجاميع المثيل في DNA هذه المجموعة من الحيوانات.