Study the effect of locally isolated lactobacillus acidophilus and its components as anticancer in vivo

Other Title(s)

دراسة تأثير بكتريا Lactobacillus acidophilus المعزولة محليا و مكوناتها كعامل مضاد للسرطان في داخل الجسم الحي

Joint Authors

Nasir, Zahrah Mahmud
Rashid, Marib Nazih
al-Rikabi, Nahi Yusuf Yasin

Source

Iraqi Journal of Biotechnology

Issue

Vol. 13, Issue 2(s) (31 Dec. 2014), pp.1-22, 22 p.

Publisher

University of Baghdad Genetic Engineering and Biotechnology for Postgraduate Studies

Publication Date

2014-12-31

Country of Publication

Iraq

No. of Pages

22

Main Subjects

Biology
Medicine

Topics

Abstract AR

كان الهدف من الدراسة هو استبيان دور العصيات اللبنية كأحياء علاجية في مجال التعامل مع القولون في الجرذان المختبرية و قد شملت الدراسة عزل و تشخيص 29 عزلة لبكتريا العصيات اللبنية (Lactobacilli) من 11 عينة لغائط الأطفال الرضع حديثي الولادة، فضلا عن عزل و تشخيص عزلة واحدة لبكتريا العصيات اللبنية من اللبن القياسي (كانون)، التي استخدمت لغرض المقارنة في اختبار تحمل الحموضة و أملاح الصفراء.

و قد استخدم نظام API 50 CH لتشخيص العزلات.

أظهرت غربلة العزلات على أساس قدرتها على مقاومة الحموضة قابلية ست عزلات على أبداء مقاومة عالية للحموضة إذ تراوحت قيم أعدادها الحية ما بين (510 x 6.3 – 510 x 1.73 وحدة تكوين مستعمرات / مللتر) مقارنة بقيم الأعداد الحية لبقية العزلات بعد 90 دقيقة من حضنها في مرق MRS برقم هيدروجيني 3.5 التي انخفضت قيم أعدادها الحية بشكل معنوي، أما في ما يخص العزلة المعزولة من اللبن القياسي لم تبد مقاومة عالية للحموضة إذ انخفضت أعدادها الحية بمدى يقارب دورة لوغاريتمية واحدة أو أكثر و التي تعد مهمة إحصائيا، و بهذا لم تبد مقاومة عالية للحموضة.

انتقيت العزلات التي أبدت مقاومة عالية للحموضة لاختبار مقاومتها لأملاح الصفراء، و قد أبدت بكتريا Lactobacillus acidophilus (أحدى العزلات المشخصة) مقاومة عالية لأملاح الصفراء، إذ كانت العزلة الأكفأ من بين العزلات المنتقاة في مقاومتها لأملاح الصفراء، أما بالنسبة لبكتريا Lb.

delbrueckii ssp bulgaricus و التي استحدث لغرض المقارنة مع بقية العزلات لم تبد مقاومة لأملاح الصفراء، إذ انخفضت قيم أعدادها الحية انخفاض شديد (أي أكثر من دورة لوغاريتمية واحدة).

تم استحثاث سرطان القولون في الجرذان المختبرية باستخدام مادة AOM) Azoxymethane) بتركيز 15 ملغم / كغم (وزن الحيوان) التي تؤدي إلى حث سرطان القولون، و ذلك بإضافة مجموعة المثيل إلى ذرة الأوكسجين السادسة في الكوانين (O6 -methyl guanine) و قد استخدمت انزيمات القطع الحساسة و غير الحساسة لمجاميع المثيل في الكشف عن حالة المثيلة، فالانزيم HpaII لا يقطع DNA الحاوي على المثيل لذلك يظهر الأخير بشكل حزمة متماسكة، في حين أن الانزيم MspI يقطع جزيئات DNA بغض النظر عن حالة المثيلة مما يؤدي إلى انتثار DNA في هلام الترحيل الكهربائي (يظهر بشكل مسحة متواصلة).

و قد أجريت دراسة التأثير الوقائي و العلاجي لخلايا و مكونات بكتريا Lb.

acidophilus في الأنظمة الحية in vivo قبل الحقن بالمادة المسرطنة (Pretreatment) و بعد الحقن (Post treatment) على المستوى الجزيئي و قد ظهرت نماذج DNA المستخلصة من قولون الجرذان المختبرية المعاملة بخلايا و مكونات بكتريا Lb.

acidophilus بشكل مسحه صغيرة ضمن هلام الترحيل مع إنزيم التقيد HpaII و هذا بدوره يعكس قابلية خلايا و مكونات بكتريا Lb.

acidophilus في التأثير و التعديل في مثيلة DNA.

مقارنة بنماذج DNA الخاصة بمجموعة حيوانات السيطرة الموجبة و التي ظهرت بشكل حزمة ضمن هلام الترحيل عند حضنها مع الإنزيم نفسه، مما يدل على وجود مجاميع المثيل في DNA هذه المجموعة من الحيوانات.

Abstract EN

The aim of this study was to investigate the role of Lactobacilli as a probiotic in colon cancer treatment in rats.

Accordingly 29 isolates of Lactobacilli was obtained from 11 samples of feces of newborns.

As well as isolating and diagnosis one isolate of Lactobacilli from standard yoghurt named (canon) which used as control for acid and bile salt tolerance.

Screening of isolate according to its ability of acid resistance, showed that six isolates were able to stand in pH3.5 for 90 min.

The number of living cells were 1.73×10P 5 P to 6.3×10P 5 P CFU/ml.

Accordingly the number of living cells of other isolates were significantly decreased after 90 min incubation in MRS broth with pH3.5 .

The isolate from standard yoghurt did not revealed high resistances to acidity since the living cells were decreased with a rrange equal about to one logarithmic cycle or more.

This behaviors is important from static point of view which indicates no high acidity resistance.

The isolates which appear high acidity resistance were selected to test its resistance to bile salts.

Lactobacillus acidophilusone of diagnosed isolates, appeared high resistance to bile salts, since it was the most efficient isolate among the selected isolate in its high resistance to bile salts.

While for Lactobacillus delbrueckii ssp bulgaricus which was used for comparison with the other isolates, revealed no resistance for bile salts since the number Components of Lactobacillus acidophilus were separated.

Colon cancer was induced in rats using Azoxymethane (AOM) at 15mg/Kg (animal body weight) by adding methyl group to guanine (O6- methyl guanine).

Two restriction enzymes were used to detect the methylation.

The first HpaII which is sensitive to presence of methyl group and the second is MspI which is resistant to methyl group so the samples treated with former will give a clear band of methylated DNA in gel electrophoresis while MspI will give diffused band when the DNA is methylated.

The prophylactic effect (pretreatment) and the therapeutic effect (post- treatment) of Lb.

acidophilus cells and its separated components was studied in vivo on the molecular level, DNA was extracted from rat colon and treated for methylation.

The results revealed that the DNA extracted from treated animal showed smear in gel electrophoresis after digestion with HpaII which means that lactobacillus could modulate the DNA methylation, in contrast to positive control group which had specific DNA methylation band which indicates the presence of methyl group in the DNA of this animals.

American Psychological Association (APA)

Rashid, Marib Nazih& Nasir, Zahrah Mahmud& al-Rikabi, Nahi Yusuf Yasin. 2014. Study the effect of locally isolated lactobacillus acidophilus and its components as anticancer in vivo. Iraqi Journal of Biotechnology،Vol. 13, no. 2(s), pp.1-22.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-643479

Modern Language Association (MLA)

Rashid, Marib Nazih…[et al.]. Study the effect of locally isolated lactobacillus acidophilus and its components as anticancer in vivo. Iraqi Journal of Biotechnology Vol. 13, no. 2 (2014), pp.1-22.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-643479

American Medical Association (AMA)

Rashid, Marib Nazih& Nasir, Zahrah Mahmud& al-Rikabi, Nahi Yusuf Yasin. Study the effect of locally isolated lactobacillus acidophilus and its components as anticancer in vivo. Iraqi Journal of Biotechnology. 2014. Vol. 13, no. 2(s), pp.1-22.
https://search.emarefa.net/detail/BIM-643479

Data Type

Journal Articles

Language

English

Notes

Includes bibliographical references : p. 21-22

Record ID

BIM-643479